使用二種酶同時進行DNA切斷反應 (Double Digestion) 時，為了節省反應時間，通常希望在同一反應體系內進行。TaKaRa采用Universal Buffer表示系統，并對每種酶表示了在各Universal Buffer中的相對活性。盡管如此，在進行Double Digestion時，有時還會難以找到合適的Universal Buffer。
本表以在pUC系列載體的多克隆位點處的各限制酶為核心，顯示了在Double Digestion可使用的最佳Universal Buffer條件。在本表中，各Universal Buffer之前表示的 [數字×] 是指各Universal Buffer的反應體系中的最終濃度。TaKaRa銷售產品中添附的Universal Buffer全為10倍濃度的緩沖液。終濃度為0.5×時反應體系中的緩沖液則稀釋至20倍，1×時稀釋至10倍，2×時稀釋至5倍進行使用。

◇ 1 μg DNA中添加10 U的限制酶，在50 μl的反應體系中，37℃下反應1小時可以完全降解DNA。
◇ 為防止Star活性的產生，請將反應體系中的甘油含量，盡量控制在10%以下。
◇ 根據DNA的種類，各DNA的立體結構的差別，或當限制酶識別位點鄰接時，有時會發生Double Digestion不能順利進行的可
能。