冰凍切片糖原高碘酸希爾(PAS)法染色試劑盒產品說明書(中文版)
主要用途
冰凍切片糖原高碘酸希爾(PAS)法染色試劑是一種旨在通過高碘酸氧化糖原中的糖基為乙醛,使用品紅亞硫酸鹽染料,產生品紅色或紫紅色,來分析組織樣本中糖原成分的權威而經典的技術方法。該技術經過精心改良傳統方法、成功實驗證明的。主要適用于各種冰凍組織切片中的糖原成分,尤其可用于分析未分化鱗狀細胞腫瘤(squamous cell carcinoma)基底膜以及各種不同器官上皮分泌的酸性粘液物質(mucosubstance)。產品即到即用,操作簡捷,性能穩定,顯色清晰。
技術背景
糖原(glycogen)存在于皮膚、肝臟、甲狀旁腺(parathyroid gland)、骨骼肌和心肌中。高碘酸(periodic acid)可以氧化糖原中的多糖(polysaccharide)糖基,包括乙二醇(1,2-glycol)中的碳原子,成為乙醛基團(aldehyde group),與希爾試劑(Schiff’s Reagent),即品紅亞硫酸鹽染料(fuchsin sulfite)發生反應,呈現品紅色(magenda)或紫紅色沉淀產物(品紅乙醛;aldehyde fuchsin),表明糖原陽性。
產品內容
清理液(Reagent A) 250毫升
固定液(Reagent B) 10毫升
氧化液(Reagent C) 10毫升
染色液(Reagent D) 10毫升
產品說明書 1份
保存方式
保存在室溫下;染色液(Reagent D),嚴格密封瓶口,避免光照;試劑具有腐蝕性,注意操作安全;有效保證6月
用戶自備
通用型蘇木素復染試劑盒(80067.1):用于常規染色后復染
小型染色缸:用于組織染色操作
光學顯微鏡:用于組織染色后觀察分析
實驗步驟
一、樣本染色處理
- 取出待測的5微米厚的冰凍組織切片
- 小心加上200微升清理液(Reagent A)在切片上,鋪滿整個樣品表面
- 小心移去切片上的清理液(Reagent A)
- 小心加上200微升固定液(Reagent B),鋪滿整個切片樣品表面
- 室溫下,孵育5分鐘
- 小心移去切片上的固定液(Reagent B)
- 室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(Reagent A)中孵育5分鐘
- 小心移去切片上的清理液(Reagent A)
- 小心加上200微升氧化液(Reagent C),鋪滿整個樣品表面
- 室溫下,孵育5分鐘
- 小心移去切片上的氧化液(Reagent C)
- 室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(Reagent A)中孵育5分鐘
- 小心移去切片上的清理液(Reagent A)
- 小心加上200微升染色液(Reagent D),鋪滿整個切片樣品表面
- 室溫下孵育30分鐘;或直至可見深紅色,避免光照
- 小心移去切片上的染色液(Reagent D)
- 室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(Reagent A)中孵育5分鐘
- 小心移去切片上的清理液(Reagent A)
二、(選擇步驟)樣本復染處理
- 樣本復染處理(建議使用通用型蘇木素復染試劑盒-80067.1)
- 放上蓋玻片或封片
- 即刻在一般光學顯微鏡下觀察:呈現紫紅色或品紅色為糖原陽性組織,細胞核呈現藍色(復染)
注意事項
- 本產品為50次操作
- 操作時,須帶手套
- 所有操作在室溫下進行
- 避免使用甲醛和乙醛等處理樣品
- 試劑可以重復使用
- 試劑具有腐蝕性,注意操作安全
- 染色液(Reagent D)出現沉淀,可以溫熱、攪拌或過濾后使用
- 染色液(Reagent D)須密封避光,如果變成紅色,則影響染色效果
- 試劑溶液在樣品表面時,避免有氣泡存在,同時確保鋪滿樣品表面
- 樣品染色避免過度,肉眼可見深紅色即可終止染色
- 可以使用通用型蘇木素復染試劑盒(80067.1),增強染色對比度
- 染色完成后,即刻進行光學顯微鏡觀察
- 本公司提供系列組織生物化學成分分析試劑產品
質量標準
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