細(xì)胞去甲基化處理試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書（中文版）

主要用途

細(xì)胞去甲基化處理試劑是一種旨在使用DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑5-氮雜-2-脫氧胞苷誘導(dǎo)細(xì)胞基因脫甲基，重新改變?nèi)旧�質(zhì)結(jié)構(gòu)模型，產(chǎn)生基因組內(nèi)甲基化缺失狀態(tài)的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于動(dòng)物細(xì)胞和人體細(xì)胞。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，性能穩(wěn)定，作用顯著。

技術(shù)背景

在基因的啟動(dòng)子區(qū)域（promotor region）通常存在一些富含重復(fù)雙核苷酸“CG”的區(qū)域，稱為“CpG島”（CpG island）。在人類基因組內(nèi)，存在有近3萬(wàn)個(gè)CpG島。這些CpG島不僅是基因的一種標(biāo)志，而且還參與基因表達(dá)的調(diào)控和影響染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)，更是DNA甲基化的唯一位置。5-氮雜-2-脫氧胞苷（5-Aza-2-deoxycytidine；5-aza-cdR或5-aza-dC）是一種脫甲基的氨基乙醇，又稱DECITABINE。作用于強(qiáng)力抑制DNA甲基轉(zhuǎn)移酶（DNA methyltransferase）。其分子式為C8H12N4O4，分子量為228.2。通過(guò)去甲基化處理，染色質(zhì)結(jié)構(gòu)模型重新改變，使轉(zhuǎn)錄因子能夠結(jié)合在啟動(dòng)子上，形成轉(zhuǎn)錄復(fù)合物，啟動(dòng)基因表達(dá)。

產(chǎn)品內(nèi)容

處理液（Reagent A）          2毫升

清理液（Reagent B）      100毫升

產(chǎn)品說(shuō)明書           1份

保存方式

保存處理液（Reagent A）在－20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融；保存清理液（Reagent B）在4℃冰箱里； 有效保證6月

用戶自備

25cm²細(xì)胞培養(yǎng)瓶：用于培養(yǎng)細(xì)胞的容器

 DMEM完全細(xì)胞培養(yǎng)基（12052）：用于細(xì)胞培養(yǎng)的營(yíng)養(yǎng)基

血細(xì)胞計(jì)數(shù)器：用于細(xì)胞計(jì)量

實(shí)驗(yàn)步驟

• 準(zhǔn)備1瓶25cm²細(xì)胞培養(yǎng)瓶
• 接種用戶需化學(xué)去甲基化的細(xì)胞（1 X 10⁵細(xì)胞總量）
• 放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱孵育24小時(shí)，或直到細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)10％
• 小心抽去細(xì)胞培養(yǎng)液
• 小心加入3毫升用戶自備的完全細(xì)胞培養(yǎng)液
• 小心加入30微升 處理液（Reagent A） 
• 輕輕搖勻后，放進(jìn)37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱孵育24小時(shí)
• 小心抽去含有 處理液（Reagent A）的細(xì)胞培養(yǎng)液
• 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟5至8二次
• 小心加入3毫升清理液（Reagent B），清洗生長(zhǎng)中的細(xì)胞表面
• 小心抽去 清理液（Reagent B）
• 繼續(xù)后續(xù)操作

注意事項(xiàng)

• 本產(chǎn)品為20次操作
• 操作時(shí)，須戴手套
• 操作時(shí)，須嚴(yán)格無(wú)菌操作
• 用戶可以根據(jù)需求，使用不同的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶，相應(yīng)調(diào)整試劑用量
• 處理液（Reagent A）的使用比例為1：100，即1毫升培養(yǎng)液加入10微升處理液（Reagent A）
• 本公司提供系列甲基化分析試劑產(chǎn)品

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定去甲基化作用顯著

上海一基實(shí)業(yè)有限公司多年專供：ELISA試劑盒，PCR恒溫?zé)晒鉁y(cè)試盒、朗道校準(zhǔn)品、校準(zhǔn)質(zhì)控品、標(biāo)準(zhǔn)品|對(duì)照品、抗體|抗原、生物試劑、動(dòng)物血清、人類CDNA、基因組DNA、MicroRNA產(chǎn)品、總RNA產(chǎn)品、人原代細(xì)胞裂解液、生物試劑、高端試劑等系列產(chǎn)品。如需產(chǎn)品詳細(xì)說(shuō)明等物理性質(zhì)信息請(qǐng)聯(lián)系客服為您查詢！質(zhì)量保證，價(jià)格優(yōu)惠，是國(guó)內(nèi)生物試劑權(quán)威的供應(yīng)商之一，專業(yè)經(jīng)銷生物科學(xué)領(lǐng)域的品牌試劑：Sigma試劑、ASROS試劑、AIFA試劑、alding試劑、Fisher試劑、日本MBL試劑、美國(guó)劍橋CIL氘代試劑、ATCC菌株等品牌產(chǎn)品。擁有齊全的生產(chǎn)和檢測(cè)設(shè)備，實(shí)施嚴(yán)格的管理制度和完善的質(zhì)量保證體系，為廣大客戶提供全面的技術(shù)支持和完善的售后服務(wù)。歡迎來(lái)電咨詢!