生物發光成像技術中三大生物發光體系的應用適配性介紹
瀏覽次數:55 發布日期:2025-5-15
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生物發光成像(BLI)技術在疾病模型研究中具有重要價值,但其性能高度依賴于酶-底物體系的特性。本文基于實驗數據,對比 FLuc/D-熒光素鉀鹽體系、AkaLuc/Akalumine鹽酸鹽體系、 NanoLuc/HFFz 體系這三種體系的表層、深層組織穿透性及病灶定位能力,為不同實驗場景提供選型依據。
體外靈敏度與檢測極限
在體外梯度稀釋實驗中, NanoLuc/HFFz 體系在 10 個細胞時仍可檢測到穩定信號,而 FLuc/D-熒光素鉀鹽體系、AkaLuc/Akalumine 鹽酸鹽體系在此條件下信號均低于檢測閾值。
FLuc/D-熒光素鉀鹽體系:
傳統高負荷檢測
適用場景:體外大規模細胞實驗(如藥物篩選、腫瘤球生長監測)短期淺表組織成像(如皮下移植瘤體積追蹤)。
AkaLuc/Akalumine鹽酸鹽體系:
穿透性增強的中等靈敏度系統
核心價值:改良底物結構提升組織穿透性,適用于中深層組織動態監測(如肌肉內炎癥模型、淋巴結轉移)。
NanoLuc/HFFz體系:
單細胞級檢測的革命性突破
技術優勢:支持極低細胞量研究(如循環腫瘤細胞捕獲、早期微轉移灶定位),低底物負荷減少代謝毒性,適合長期實驗(如慢性疾病模型)。
FLuc/D-熒光素鉀鹽體系、 AkaLuc/Akalumine鹽酸鹽體系、 NanoLuc/HFFz體系在細胞水平上的發光檢測圖
圖使用博鷺騰 Aniview 全光譜動物活體成像系統拍攝
在體內不同位置比較實驗
● FLuc/D-熒光素鉀鹽體系
受限于組織穿透力,僅推薦用于淺表或高細胞密度區域(如皮下腫瘤短期監測)。
● AkaLuc/Akalumine 鹽酸鹽體系
在表層及深層組織(如大腦、肺部)中信號最強,其底物分子量小、脂溶性高的特性可能優化了血腦屏障穿透。憑借其穿透性優勢適合急性期監測,可快速捕捉病灶(如腦轉移瘤短期治療響應)。
● NanoLuc/HFFz 體系
雖然信號強度比 AkaLuc/Akalumine 鹽酸鹽體系的低,但以極低濃度實現有效檢測,并且也能夠進行血腦屏障穿透,其以低毒性實現持續信號,在長期毒性敏感實驗(如腦轉移慢性模型)中更具安全性優勢。
FLuc/D-熒光素鉀鹽體系、 AkaLuc/Akalumine鹽酸鹽體系、 NanoLuc/HFFz體系在體內發光檢測圖
圖使用博鷺騰 Aniview 全光譜動物活體成像系統拍攝
HFFz 發光底物體外極限細胞數量信號對比
B16F10-NanoLuc細胞-HFFz底物發光檢測圖
圖使用博鷺騰 Aniview 全光譜動物活體成像系統拍攝
B16F10-NanoLuc細胞-HFFz底物發光檢測統計圖(每個數據均進行三個重復)
成本-效益比
本實驗中 FLuc/D-熒光素鉀鹽體系試劑成本最低,但靈敏度局限;NanoLuc/HFFz 體系單次檢測成本高于 AkaLuc/Akalumine 鹽酸鹽體系,但超微檢測需求可減少實驗動物使用量。
多層次技術矩陣
FLuc/D-熒光素鉀鹽體系、 AkaLuc/Akalumine 鹽酸鹽體系、 NanoLuc/HFFz 體系形成多層次技術矩陣:
FLuc/D-熒光素鉀鹽體系憑借成本與穩定性,仍是高通量篩選的“基礎支柱”;
AkaLuc/Akalumine 鹽酸鹽體系填補深層組織實時成像空白,成為急性期研究的“透視眼”;
NanoLuc/HFFz 體系突破靈敏度極限,為精準醫學提供單細胞級“顯微鏡”。
研究者需根據目標組織的解剖特性、檢測持續性和毒性耐受閾值進行準確匹配,必要時通過多體系聯用實現實驗設計的最優化。
例如用 AkaLuc/Akalumine 鹽酸鹽體系定位轉移灶后,切換 NanoLuc/HFFz 體系進行長期微殘留監測,實現實驗設計的精細化升級。
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