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VisuTrack對曠場實驗、懸尾實驗及三箱社交實驗的同步檢測

瀏覽次數:1630 發布日期:2022-5-20  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
三廂社交檢測
本部分實驗步驟根據相關文獻所報道的方法略作修改,用于評價小鼠對于陌生目標的社交偏好。實驗開始前,將小鼠放在行為測試房間適應1 h,隨后將小鼠放入檢測廂中,檢測廂被白色的玻璃樹脂板分隔成三個聯通的空間。將陌生CD1小鼠隨機放進左側或右側箱子里的塑料籠里(與社會接觸實驗中使用的籠子相同),另外一側箱子的塑料籠子為空,去掉隔開箱子的玻璃樹脂板,使測試小鼠在三個箱子中自由活動 5min,記錄測試小鼠分別在兩個廂中的持續時間。
整個測試過程均由VisuTrack動物行為分析軟件(上海欣軟,中國)進行數據采集和分析。
曠場檢測(open field test,OFT)
參考相關文獻描述,并結合實驗室條件進行適應性改變。訂制曠場檢測專用箱,首先將小鼠放入曠場檢測箱中,自由活動15 min,同時由 VisuTrack動物行為分析軟件進行拍攝、錄制和軌跡記錄,統計小鼠檢測箱中的運動總距離。本行為學可通過記錄小鼠的總運動距離來反映小鼠的運動能力。
懸尾檢測
參考相關文獻描述,結合VisuTrack動物行為分析軟件的自動分析功能,通過對小鼠不動時間的判定衡量小鼠的焦慮水平。將小鼠放入檢測房間適應 1 h,首先用被剪裁過的塑料槍頭套在C57BL/6J 小鼠尾巴上,防止小鼠攀爬,醫用膠帶固定尾巴末端處,然后將其懸吊于懸尾檢測架上,小鼠距離地面高度約25 cm。因處于非正常的倒掛狀態,小鼠表現出掙扎等行為,采用VisuTrack動物行為分析軟件進行記錄和觀察,實時分析并統計 6min 內小鼠不動時間。
鈣信號光纖記錄
鈣信號光纖記錄(fiber photometry recording)是一種實時檢測細胞活性變化的手段。其原理是通過利用GCa MP6m,一種鈣離子濃度敏感蛋白,檢測特定神經元內鈣離子信號的變化情況,記錄生理條件下特定神經元熒光信號的變化,根據熒光信號的變化來分析特定神經元的活動,進而將神經元信號的改變和行為學反應聯系起來,研究神經元的行為學功能。本課題主要記錄小鼠在焦慮抑郁相關的行為實驗范式下神經元信號的改變。

首先采用 4周C57BL/6J小鼠 , 根據前所述的方法d CA3 注射AAV-Ca MKIIα-GCa MP6s-WPREs-p A 病毒,并在注射位置植埋光纖,待4周后,病毒充分表達,我們就將小鼠置于籠中,將其與一只CD1小鼠進行 5min接觸檢測,同時使用在體光纖記錄儀進行記錄,同時使用VisuTrack動物行為分析軟件對社交行為進行記錄,將其社交接觸信號和記錄的鈣信號進行偶聯分析,計算并統計在社交行為期間小鼠d CA3腦區中的 ΔF/F值。

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