DNA甲基化——HRM檢測服務(wù)

    DNA甲基化是發(fā)生在DNA堿基序列上的一種共價修飾。在哺乳動物中，DNA甲基化主要發(fā)生在5-CpG-3雙核苷酸序列的胞嘧啶上。在人類基因組中，大約有60～70的CpG胞嘧啶是甲基化的，其程度因不同的物種和細(xì)胞類型而異。DNA甲基化狀態(tài)在基因組中呈現(xiàn)出一定的分布模式，90％的甲基胞嘧啶位于重復(fù)序列上。DNA甲基化可以遺傳，并改變了DNA的結(jié)構(gòu)特性與基因活動方式。

DNA甲基化意義： 

    靶序列上甲基基團(tuán)的存在可以影響轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合，引起轉(zhuǎn)錄抑制，從而使該基因表達(dá)受到抑制。啟動子區(qū)CPG島的甲基化常常可以抑制該基因的轉(zhuǎn)錄，尤其是對于抑癌基因，凋亡相關(guān)基因，DNA修復(fù)基因等，啟動子區(qū)域發(fā)生甲基化會影響功能的發(fā)揮。不同的腫瘤組織基因甲基化狀態(tài)不一樣，可以作為早期檢測，監(jiān)測腫瘤形成的重要標(biāo)志物。對于某些特異基因的甲基化，更加重要，如DNA修復(fù)基因，可以引起對化療藥物的敏感，從而作為藥物治療療效的評價指標(biāo)，指導(dǎo)臨床用藥。

檢測方法： 

    甲基化特異性PCR、Northern印跡法、Western印跡法、免疫細(xì)胞化學(xué)等，這些檢測方法需要花費大量時間，成本高，在臨床推廣應(yīng)用時均存在一定的困難。

    高分辨率熔解（High Resolution Melt,HRM）是一種最新的在表觀遺傳學(xué)中檢測 CpG 位點的一種新技術(shù)，主要是根據(jù)DNA序列的長度、GC含量、堿基互補(bǔ)性差異和特定飽和染料可以插入DNA雙鏈中的特性,應(yīng)用高分辨率的熔解曲線對樣品進(jìn)行分析，其分辨精度可以達(dá)到對單個堿基差異的區(qū)分。

DNA甲基化-HRM檢測原理： 

    甲基化敏感性高分辨率熔解曲線分析（MS-High Resolution Melting Curve Analyse）是一種不需要 PCR 產(chǎn)物后續(xù)操作的，簡單且靈敏的檢測基因甲基化水平的方法。該方法主要通過比較曲線的熔解溫度和峰形得以實現(xiàn)并且可以在一些列的 CpG 位點中檢測出單一的一個甲基化的發(fā)生，同時，也可以對一系列的 CpG 位點的甲基化水平進(jìn)行分析。單個 CpG 位點的甲基化和平均的甲基化水平會對熔解曲線的形狀造成影響。采用重亞硫酸鹽處理 DNA 模板可以使 5-甲基胞嘧啶轉(zhuǎn)化為尿嘧啶。在PCR反應(yīng)前，在非CpG島位置設(shè)計一對針對經(jīng)亞硫酸氫鈉處理后DNA 鏈的引物，這對引物中間包含有意義的甲基化CpG島，一旦這些CpG島發(fā)生甲基化，使胞嘧啶（C）不發(fā)生變化，而與未甲基化的胞嘧啶（C）轉(zhuǎn)變成胸腺嘧啶（T），樣品中的 GC 含量發(fā)生了變化，最終被轉(zhuǎn)化成了熔解曲線 Tm 值之間的差異。 CpG 位點在小的擴(kuò)增片段內(nèi)的相對位置也會對熔解峰的形狀產(chǎn)生影響，因此，根據(jù)Tm值和熔解峰的形狀可以檢測出樣本的甲基化位點和甲基化程度。 

    HRM方法操作簡單、靈敏高、重復(fù)性高、成本低、不受檢測位點的局限高度等等優(yōu)勢，將對于遺傳學(xué)、腫瘤學(xué)等方面的研究和臨床應(yīng)用提供更大的幫助。

我們的服務(wù)：

l 免費的項目咨詢

l 客戶提供樣本DNA的分離、純化（可有為真公司代為提取）

l 根據(jù)客戶提供相關(guān)信息進(jìn)行引物設(shè)計、方案設(shè)計

l 亞硫酸氫鈉處理DNA并運用HRM技術(shù)獲得特異溶解曲線

l 結(jié)果分析，出具實驗報告，為臨床用藥提供依據(jù)

 

我們的優(yōu)勢：

蘇州為真生物在MS-HRM分析和研究方面積累了豐富的經(jīng)驗，擁有開展MS-HRM研究的先進(jìn)儀器設(shè)備，具有自己獨到的研究策略和方法，能為你高效快速的進(jìn)行MS-HRM分析，找出有意義的CpG甲基化。

服務(wù)熱線：13913580076

蘇州為真生物醫(yī)藥有限公司
Suzhou MicroDiag Biomedicine Co., Ltd.


蘇州為真生物醫(yī)藥有限公司（Suzhou MicroDiag Biomed Co., Ltd）/蘇州腫瘤分子診斷工程技術(shù)研究中心是一家擁有一支學(xué)科結(jié)構(gòu)合理、掌握國際領(lǐng)先技術(shù)、富有創(chuàng)新精神的專業(yè)技術(shù)人才團(tuán)隊的醫(yī)藥類高科技研發(fā)型企業(yè)，立足于開發(fā)自主知識產(chǎn)權(quán)的癌癥個體化醫(yī)療診斷試劑盒，致力于成為“個性化醫(yī)療時代” 的檢測專家！公司2008年9月注冊成立，資金1010萬，由國內(nèi)著名風(fēng)投機(jī)構(gòu)中新創(chuàng)業(yè)投資有限公司投資，正進(jìn)行千萬美元級別的I期融資。

公司坐落于國家級高新技術(shù)開發(fā)區(qū)——蘇州工業(yè)園（China-Singapore Suzhou Industrial Park）生物納米科技園（bioBay）。目前公司/中心已建立標(biāo)準(zhǔn)化實驗室、III類GMP標(biāo)準(zhǔn)分子診斷試劑盒生產(chǎn)車間和II類醫(yī)療器械生產(chǎn)廠房，總面積超過3000m2；現(xiàn)有高級研究員5名，歸國人員2名，博士8名，碩士十余名，員工均本科以上學(xué)歷；配備LightCyclerTM 480 PCR儀、Nano1000定量儀、Bio-Rad蛋白電泳儀、DAKO自動染色成像儀、BD FACSCalibur流式細(xì)胞儀等現(xiàn)代化分子實驗儀器。2010年4月中心/公司獲江蘇省藥監(jiān)局頒發(fā)的III類分子診斷試劑盒和II類醫(yī)療器械生產(chǎn)許可證。

公司已獲批準(zhǔn)“蘇州腫瘤分子診斷工程技術(shù)研究中心”，已申報建設(shè)“江蘇省腫瘤分子診斷工程技術(shù)研究中心”，公司是“蘇州市內(nèi)資研發(fā)機(jī)構(gòu)”， “江蘇省民營高科技企業(yè)”。近期，中心/公司作為核心成員參加由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院和蘇州工業(yè)園區(qū)聯(lián)合組建的“蘇州創(chuàng)新生物醫(yī)藥研究中心”，承擔(dān)其中“腫瘤分子診斷平臺”建設(shè)和運行。

蘇州為真以領(lǐng)先的癌癥檢測國際專利技術(shù)MiDTM為依托，正引領(lǐng)癌癥篩查和診斷全面進(jìn)入“分子”時代。MiDTM突破了從腫瘤細(xì)胞死亡后DNA片段中檢測微量突變的關(guān)鍵技術(shù)，第一次實現(xiàn)了血清或血漿等非細(xì)胞體系的基因突變的高靈敏度集成式檢測，已形成三大系列檢測產(chǎn)品：“個性化用藥指導(dǎo)檢測試劑盒”、“早期癌癥篩查和診斷試劑盒”、“癌癥篩查套餐和預(yù)后、復(fù)發(fā)監(jiān)控的產(chǎn)品”，形成國內(nèi)最全面最專業(yè)的個性化醫(yī)療檢測方案，實現(xiàn)個性化用藥指導(dǎo)、健康篩查、超早期預(yù)警、早期診斷、預(yù)后指導(dǎo)和復(fù)發(fā)監(jiān)控等。已獲5項國家發(fā)明專利，申請15項新發(fā)明專利，包括7項國際發(fā)明專利。2009年獲省部級課題經(jīng)費達(dá)到128萬余元，2010年預(yù)計研究經(jīng)費超過400萬左右。


為真人始終堅持“為真求實，開拓創(chuàng)新”的價值理念，以實現(xiàn)“更好的診斷(Better Diagnosis)，更好的健康(Better Health)”是自己不懈的使命。