免疫印跡超敏型辣根過氧化酶/四甲基聯苯胺顯色試劑盒產品說明書（中文版）

主要用途

免疫印跡超敏型辣根過氧化酶/四甲基聯苯胺（HRP-TMB）顯色試劑是一種旨在通過過氧化物酶的催化，輔以增效穩定劑的參與，使底物四甲基聯苯胺氧化形成藍黑色沉淀產物，以此鑒定過氧化物酶活性，進而確定目標分子表達的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于辣根過氧化酶標記的免疫學檢測包括蛋白質西方雜交（Western blot）和其它分子檢測，例如南方（Southern blot）、北方（Northern blot）和點狀（Dot blot）印跡檢測等。產品即到即用，性能穩定，操作便捷，非常敏感，顯色清晰，重復性好。

技術背景

四甲基聯苯胺（3,3’,5,5’-tetramethylbenzidine；TMB）是過氧化物酶（Peroxidase）的生色底物，在過氧化物酶的催化下，電子供體TMB底物在過氧化氫氧化下失去電子，產生游離自由陽離子單電子氧化產物，輔以增效穩定劑，在pH3.3條件下，呈現出顏色變化和沉積，形成藍黑色沉淀產物，且不受乙醇影響。被用于檢測過氧化物酶的活性，靈敏度特高，特異性好。

產品內容

染色液（Reagent A）     100毫升

產品說明書      1份

保存方式

保存在4℃冰箱里，避免光照，注意操作安全；有效保證6月

用戶自備

無離子水：用于清洗染色后的樣品或印跡膜

PBST（12131）或TBST（12130）溶液：用于切片或印跡膜清洗

成像儀：用于記錄印跡染色圖像

實驗步驟

• 準備好含有待測分子的固相膜（5 X 8 cm2）：包括電泳、轉印、封阻、一抗（或生物素）處理、辣根過氧化酶（HRP）標記的二抗（或鏈霉親和素）處理、清洗等步驟
• 加入5毫升室溫預熱的染色液（Reagent A），鋪滿整個固相膜表面
• 在室溫下孵育5至30分鐘，或直至藍黑色沉淀出現；避免光照
• 用鑷子夾起固相膜，放進用戶自備的無離子水里
• 室溫下孵育1分鐘
• 空氣中晾干，避免光照
• 數碼相機拍照記錄

注意事項

• 本產品為10次（10 X 10 cm²體系印跡膜）和20次（5 X 8 cm²印跡膜）操作
• 本產品較之二氨基聯苯胺（DAB）等染色，敏感10至20倍
• 用戶可以根據需求，調整試劑用量
• 操作時，須戴手套
• 本產品適合于PVDF或硝酸纖維素（nitrocellulose）印跡膜
• 染色前清洗時，建議使用PBST或TBST溶液，避免使用酚類化合物和防腐劑，例如硫柳汞（thimerosal）
• 染色液（Reagent A）具有毒性，注意操作安全
• 本產品非常敏感，染色時間可以根據情況調整，以免造成過度染色或背景過深
• 如果封閉欠佳，易造成背景顏色過深
• 本產品只能用于辣根過氧化酶（HRP）標記的染色
• 如果染色過快或過深，以及染色沉淀物漂浮，建議稀釋一抗和二抗濃度
• 固相膜染色后可在暗室里保存1周，但不能永久保存
• 本公司提供系列免疫印跡染色試劑產品

質量標準

• 本產品經鑒定性能穩定
• 本產品經鑒定顯色清晰

上海一基實業有限公司多年專供：ELISA試劑盒，PCR恒溫熒光測試盒、朗道校準品、校準質控品、標準品|對照品、抗體|抗原、生物試劑、動物血清、人類CDNA、基因組DNA、MicroRNA產品、總RNA產品、人原代細胞裂解液、生物試劑、高端試劑等系列產品。如需產品詳細說明等物理性質信息請聯系客服為您查詢！質量保證，價格優惠，是國內生物試劑權威的供應商之一，專業經銷生物科學領域的品牌試劑：Sigma試劑、ASROS試劑、AIFA試劑、alding試劑、Fisher試劑、日本MBL試劑、美國劍橋CIL氘代試劑、ATCC菌株等品牌產品。擁有齊全的生產和檢測設備，實施嚴格的管理制度和完善的質量保證體系，為廣大客戶提供全面的技術支持和完善的售后服務。歡迎來電咨詢!