全組織茜素紅（ALIZARIN RED S）鈣染色試劑盒產品說明書（中文版）

主要用途

全組織茜素紅（ALIZARIN RED S）鈣染色試劑是一種旨在通過鰲和技術，使鈣離子和茜素紅S產生復合物，來分析固定處理的原始組織細胞樣本中橘紅色鈣沉積現象的權威而經典的技術方法。該技術經過精心改良、成功實驗證明的。主要適用于各種動物和人體組織的鈣沉積和鈣化結節檢測。廣泛用于骨細胞或組織病理生理的研究。產品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩定，顯色清晰。

技術背景

茜素紅（ALIZARIN RED S）是一種蒽醌（anthraquinone）衍生物：9,10-二氫-3,4-二羥基-9,10-二氧代-2-蒽磺酸單鈉鹽（9,10-Dihydro-3,4-dihydroxy-9,10-dioxo-2-anthracenesulfonic acid sodium salt），又稱媒介紅 3（Mordant Red 3）或茜素磺酸鈉（Sodium alizarinesulfonate）。其分子式為C₁₄H₇NaO₇S，分子量為342.25。茜素紅和鈣離子以鰲和方式形成復合物，用以識別組織細胞的鈣鹽成分。鈣鹽變化是骨細胞增殖分化和骨組織成骨潛能的標志之一。通過茜素紅染色，產生桔紅色沉積，但會受到其它金屬元素的干擾。

產品內容

清理液（Reagent A）  150毫升

固著液（Reagent B）   30毫升

染色液（Reagent C）   30毫升

產品說明書    1份

保存方式

保存在4℃冰箱里；染色液（Reagent C），避免光照；有效保證6月

用戶自備

6孔細胞培養板：用于組織染色操作

切片儀：用于石蠟或冰凍切片

光學顯微鏡：用于組織染色后觀察分析

實驗步驟

• 準備1個6孔細胞培養板
• 放進新鮮切除的動物組織樣本（注意：建議組織大小為0.5厘米厚，1厘米長；如果過大，最好刀切處理一下）
• 將組織壓平
• 小心加入3毫升清理液（Reagent A），清洗組織樣本
• 小心抽去清理液
• 小心加入3毫升固定液（Reagent B），浸沒整個組織
• 室溫下孵育1小時
• 小心抽去固定液
• 小心加入3毫升清理液（Reagent A），清洗組織樣本
• 在室溫下孵育5分鐘
• 小心抽去清理液（Reagent A）
• 重復實驗步驟9至11一次
• 小心加入3毫升染色液（Reagent C），浸沒整個組織
• 室溫下孵育2分鐘（注意：可以延長至20分鐘）；或直至可見桔紅色
• 小心抽去染色液（Reagent C）
• 小心加入3毫升清理液（Reagent A）
• 室溫下孵育2分鐘
• 小心抽去清理液（Reagent A）
• 后續石蠟切片（6微米厚）或冰凍切片（10微米厚）
• 在光學顯微鏡下觀察和計數：鈣沉積陽性細胞呈現桔紅色

注意事項

• 本產品為10次（10個樣本）操作
• 操作時，須帶手套
• 所有操作在室溫下進行
• 原始組織大小可以1厘米厚、2厘米長進行染色，但建議越小越佳
• 用戶根據實際需求，調整試劑用量
• 樣品染色避免過度，肉眼可見桔紅色即可終止染色
• 染色完成后，可以進行光學顯微鏡觀察 
• 全組織染色存在其染色不均勻、組織內部染色滲透困難等局限
• 本公司提供系列鈣離子分析試劑產品

質量標準

• 本產品經鑒定性能穩定
• 本產品經鑒定顯色清晰

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