 |
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||
| [發表評論] [本類其他產品] [本類其他供應商] [收藏] | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 銷售商： 上海一基實業有限公司 | 查看該公司所有產品 >> |
生物素核酸－蛋白結合反應試劑盒產品說明書（中文版）
主要用途
生物素核酸－蛋白結合反應試劑是一種旨在通過使用純化蛋白或細胞/組織粗提液和標記DNA或RNA探針（同位素或生物素等）進行結合，產生核酸蛋白復合物的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于后續凝膠遷移電泳分析（Electrophoretic Mobility Shift Assay；EMSA）技術。廣泛應用于定性檢測DNA結合序列和定量檢測序列特異性DNA結合蛋白（例如轉錄因子）及其突變形成等。產品即到即用，性能穩定，操作便捷，結合特異，重復性好。
技術背景
DNA和蛋白質的相互作用是調控細胞反應過程的要素之一。凝膠遷移電泳分析（Electrophoretic Mobility Shift Assay；EMSA）技術，簡稱為凝膠遷移（Gel Shift）或凝膠阻滯實驗（Gel Retarding Assay），是一項確定DNA和蛋白質相互作用，分析基因調控的主要分析技術。在電泳場中，DNA蛋白復合體較之游離DNA或蛋白分子的移動速率要緩慢，基于此，通過將純化的蛋白和細胞/組織粗提液與標記DNA或RNA探針一同反應，來確定DNA蛋白的特異結合。
產品內容
緩沖液（Reagent A） 1毫升
反應液（Reagent B） 100微升
去干擾液（Reagent C） 20微升
強化液（Reagent D） 500微升
上樣液（Reagent E） 200微升
產品說明書 1份
保存方式
保存反應液（Reagent B）、去干擾液（Reagent C）、強化液（Reagent D）、 在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；上樣液（Reagent E），避免光照，有效保證12月
用戶自備
寡核苷酸探針：用于探測蛋白結合反應
粗提核蛋白（30023）或細胞總蛋白（30002）：待測樣品
純化抗體：用于超級結合反應（SUPERSHIFT）
1.5毫升離心管：用于反應操作的容器
震蕩器：用于混勻反應物
微型臺式離心機：用于沉淀反應物
實驗步驟
- 準備2個1.5毫升離心管
- 按照下表依次加入反應物
|
內容物 |
結合反應 |
競爭反應 |
|
反應液（Reagent B） |
2微升 |
2微升 |
|
用戶自備的寡核苷酸 |
―― |
1微升（總量100納克） |
|
用戶自備的標記探針 |
2微升（總量2至4納克） |
1微升（總量1納克） |
|
去干擾液（Reagent C） |
1微升 |
―― |
|
用戶自備的純化抗體 |
1微升（總量100至200納克） |
―― |
|
強化液（Reagent D） |
1微升 |
1微升 |
|
待測樣品 （純化特定蛋白 或粗提核蛋白 或細胞總蛋白） |
2微升 （總量25納克 或2至5微克 或5至10微克） |
2微升 （總量25納克 或2至5微克 或5至10微克） |
|
緩沖液（Reagent A） |
總量至20微升 |
總量至20微升 |
- 渦旋震蕩3秒
- 放進微型臺式離心機瞬時離心
- 放進冰槽里孵育30分鐘
- 分別加入5微升上樣液（Reagent E）
- 同時加入3微升上樣液（Reagent E）到2微升標記探針
- 置入冰槽里等待上樣
注意事項
- 本產品為20次操作
- 操作時，須戴手套
- 建議使用單鏈DNA寡核苷酸作為標記探針
- 長標記探針（100至500堿基）可以用于多蛋白結合檢測
- 如果檢測轉錄因子，可以使用純化蛋白、部分純化蛋白，或細胞核提取液
- 抗體的使用，可以使電泳遷移顯著
- 本公司提供完整生物素核酸蛋白結合凝膠遷移電泳分析產品，建議使用生物素核酸蛋白結合凝膠遷移電泳分析（EMSA）試劑盒－30019.2
- 本公司提供系列蛋白研究產品
質量標準
- 本產品經鑒定性能穩定
- 本產品經鑒定結合效果滿意
24小時電話： 13311756131
客服: QQ:2851717098
