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蛋白質尼羅紅染色試劑盒產品說明書(中文版)
主要用途
蛋白質尼羅紅染色試劑是一種旨在使用一種熒光染料尼羅紅直接在聚丙烯酰胺凝膠上進行染色,數分鐘內在清晰背景上產生靈敏度10納克以下蛋白質,通過紫外光激發顯示紅色條帶的權威而經典的技術方法。該技術由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。其適用于單向或雙向變性或天然蛋白電泳的檢測。產品即到即用,性能穩定,一步操作,敏感度高,顯色清晰,重復性好,建立標準化體系。
技術背景
尼羅紅染色劑(9-diethylamino-5H-benzo[alpha]-phenoxazine-5-one;Nile red)是一種水溶性的熒光染料。與蛋白質結合后,在紫外光的激發下,顯示紅色。無需固著處理。可以用于考馬斯亮藍染色后的再染色。可與質譜分析兼容。SDS將顯著增強染色效果。
產品內容
清理液(Reagent A) 250毫升
染色液(Reagent B) 20毫升
產品說明書
保存方式
保存在4℃冰箱里, 避免光照,有效保證2月
用戶自備
塑料盤:用于染色的容器
無離子水:用于稀釋試劑的溶液
平式搖蕩儀:用于染色操作時的孵育
實驗步驟
實驗開始前,完成SDS-PAGE蛋白電泳的運行,取出6cm X 8cm 的膠體,作好定向標記,然后進行下列操作:
1.準備一個8cm X 10cm 大小的染色塑料盤
2.放入聚丙烯酰胺凝膠
3.加入10毫升清理液(Reagent A)在凝膠上,覆蓋整個膠體
4.小心倒掉染色盤里的清理液(Reagent A)
5.加入49毫升用戶自備的無離子水
6.加入1毫升染色液(Reagent B),強烈混勻,使染色液均勻分布(注意:不要損壞膠體)
7.在室溫下平式搖蕩儀上孵育5分鐘,速度為50RPM,避免光照
8.小心倒掉染色盤里的染色液
9.加入50毫升用戶自備的無離子水,用手搖動10秒
10.小心倒掉無離子水
11.重復實驗步驟9-10三次
12.即刻放在UV透射儀上觀察和照相:條帶顯示紅色
13.可以繼續進行考馬斯亮藍染色
注意事項
1.本產品為20次操作
2.膠體越大,用量相應增加
3.建議電泳運行緩沖液中的SDS終濃度為0.05%,以降低背景噪音
4.操作時須戴手套
5.建議用無離子水稀釋或清洗
6.孵育溫度為室溫
7.孵育后,即刻進行觀察;放置時間過久,影響效果
8.本公司提供系列蛋白染色試劑產品
質量標準
1.本產品經鑒定性能穩定
2.本產品經鑒定染色效果出色