口腔粘膜細胞基因組DNA純化試劑盒產品說明書（中文版）

主要用途

口腔粘膜細胞基因組DNA純化試劑是一種旨在使用高鹽析出技術，簡易快速地分離口腔粘膜細胞基因組DNA的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于漱口（mouthwash）或棉簽刮搽（swab）樣品的分析。可用于后續PCR擴增分析、臨床遺傳鑒定、單核苷酸多態性分析（SNP）等操作。產品即到即用，性能穩定，操作簡便，回收效率出色，為國際上同類產品最佳。

技術背景

口腔粘膜細胞容易獲取，避免了損傷性抽血取樣。通過一種快速、安全的技術，即采用高鹽離子濃度達到萃取基因組DNA，以用于廣泛的基因分析。同時也是教學實驗中常用的方法之一。

產品內容

緩沖液（Reagent A） 100毫升

裂解液（Reagent B） 15毫升

鹽析液（Reagent C）  8毫升

沉淀液（Reagent D）          25毫升

清理液（Reagent E） 25毫升

保存液（Reagent F）  1毫升

產品說明書     1份

保存方式

保存在4℃冰箱里，有效保證6月

用戶自備

醫用無菌棉簽：用于刮落口腔粘膜細胞

漱口水：用于獲取口腔脫落細胞

2毫升離心管：用于樣品操作的容器

50毫升錐形離心管：用于漱口收集的容器

臺式離心機：用于沉淀口腔細胞

微型臺式離心機：用于沉淀細胞和核酸

渦旋震蕩儀：用于混勻反應物

實驗步驟

• 樣品準備

方法一：棉簽法（SWAB）

• 加入2毫升緩沖液（Reagent A）到15毫升錐形離心管
• 使用新鮮的醫用無菌棉簽旋轉用力刮搽口腔左右內側粘膜1分鐘
• 移入醫用無菌棉簽到離心管
• 浸入到緩沖液（Reagent A），強力反復攪動30秒
• 在離心管內擠壓醫用無菌棉簽上的液體
• 重復實驗步驟2至5一或二次

方法二：漱口法（MOUTHWASH）

• 喝上50毫升漱口水或瓶裝飲用水
• 用力漱口5分鐘
• 吐回到50毫升錐形離心管
• 放進臺式離心機離心10分鐘，速度為300g
• 小心抽去上清液
• 加入2毫升緩沖液（Reagent A），混勻細胞顆粒群

二、DNA萃取

• 轉移到2毫升離心管
• 放進微型臺式離心機離心5分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）
• 小心抽掉上清液
• 加入300微升裂解液（Reagent B），混勻細胞顆粒群
• 加入150微升鹽析液（Reagent C）
• 渦旋震蕩15秒
• 放進微型臺式離心機離心15分鐘，速度為4500g（或7000RPM，例如eppendorf 5415）
• 移出上清液到新的1.5毫升離心管
• 加入450微升沉淀液（Reagent D）
• 上下傾倒10次混勻
• 放進微型臺式離心機離心15分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）
• 小心抽掉上清液
• 加入500微升清理液（Reagent E）
• 放進微型臺式離心機離心15分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）
• 小心抽掉上清液
• 室溫下晾干
• 加入15微升保存液（Reagent F）
• 放進4℃冰箱過夜或溶解后，繼續后續操作
• 移取5微升進行50微升的PCR反應

注意事項

• 本產品為50次操作
• 操作時，須戴手套
• DNA產量取決于樣品中細胞提取程度，通常可以獲得50至1000納克不等
• 如果DNA產量不足，建議采用多次強力棉簽刮脫或用力漱口5分鐘方法（起床后第一次為最佳）
• 本公司提供系列基因組DNA萃取試劑產品

質量標準

• 本產品經鑒定性能穩定
• 本產品經鑒定純化滿意

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