粉碎法聚丙烯酰胺膠回收試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)（中文版）

主要用途

粉碎法聚丙烯酰胺膠回收試劑是一種旨在直接通過(guò)離心粉碎和濾芯離心來(lái)收集聚丙烯酰胺凝膠上DNA或RNA的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種大小DNA、寡核苷酸合成以及SAGE技術(shù)等。產(chǎn)品即到即用，性能穩(wěn)定，簡(jiǎn)便有效，純化程度和產(chǎn)量皆高。

技術(shù)背景

變性聚丙烯酰胺凝膠電泳（denaturing polyacrylamide gel eletrophoresis）是一種完全基于核酸分子量而不是分子結(jié)構(gòu)達(dá)到高分辯力的分離核酸分子的技術(shù)方法。無(wú)論是單鏈還是雙鏈、DNA還是RNA、合成的還是酶切的寡核苷酸，都能獲得滿(mǎn)意的純化結(jié)果。

產(chǎn)品內(nèi)容

穿孔離心管 20套

濾芯離心管 20套

擠壓塞 1件

洗脫液（Reagent A） 5毫升

產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)    1份

保存方式

保存洗脫液（Reagent A）在4℃冰箱里，其余的保存在室溫下，有效保證6月

用戶(hù)自備

刀片：用于切割膠體

1.5毫升離心管：用于樣品操作的容器

微型臺(tái)式離心機(jī)：用于沉淀DNA

實(shí)驗(yàn)步驟

• 仔細(xì)切下電泳后聚丙烯酰胺凝膠上的DNA條帶
• 放進(jìn)穿孔離心管
• 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心3分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）
• 仍掉穿孔離心管，確保沒(méi)有凝膠物質(zhì)殘留
• 加入50或100微升洗脫液（Reagent A）
• 渦旋震蕩15秒
• 放進(jìn)65℃恒溫水槽孵育15分鐘，期間渦旋震蕩15秒二次
• 移出50或100微升液體到濾芯離心管
• 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）
• 用刀片切去2毫升離心管底部
• 用擠壓塞擠出2毫升離心管內(nèi)所有膠體到濾芯離心管
• 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）
• （選擇步驟）轉(zhuǎn)180度方向再離心15分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）
• 去掉濾芯
• 放進(jìn)4℃冰箱保存或即刻進(jìn)行PCR操作
• 或繼續(xù)濃縮以及高質(zhì)純化

注意事項(xiàng)

• 本產(chǎn)品為20次操作
• 本產(chǎn)品適合于各種染色條件的DNA條帶，包括溴化乙腚染色、銀染、SYBR Green染色等
• 操作時(shí)須戴手套
• 使用新的或經(jīng)過(guò)酒精消毒的刀片切割條帶膠體和2毫升離心管底部
• 擠壓塞使用后，須酒精處理
• 洗脫液的量取決于條帶膠體的大小，一個(gè)條帶50微升。不要超過(guò)6個(gè)條帶
• 必要時(shí)，可以采�。�70℃冷凍法（孵育60分鐘）增加膠回收效率
• 必要時(shí)，可以增加孵育時(shí)間，加強(qiáng)核酸滲透
• 高質(zhì)純化回收產(chǎn)物用于測(cè)序等為理想選擇
• 高質(zhì)純化廣泛應(yīng)用于尖端基因技術(shù)操作，例如SAGE技術(shù)、數(shù)字化染色體基因型完全分析技術(shù)、克隆純化技術(shù)等
• 本公司提供系列膠回收試劑產(chǎn)品

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定回收產(chǎn)量和純度顯著 

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