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熒光光度計(jì)與超微量分光光度計(jì)用途比較

瀏覽次數(shù):342 發(fā)布日期:2025-3-21  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
熒光光度計(jì)與超微量分光光度計(jì)兩者均可實(shí)現(xiàn)對(duì)DNA、RNA以及蛋白質(zhì)濃度的定量,但他們之間有什么區(qū)別呢?
一、技術(shù)原理對(duì)比
  1. 熒光計(jì)
  • 原理:基于熒光染料與靶分子(如DNA、RNA、蛋白質(zhì))特異性結(jié)合的原理,通過(guò)激發(fā)光激發(fā)熒光信號(hào)并檢測(cè)其強(qiáng)度來(lái)定量。
  • 優(yōu)勢(shì)
    • 靈敏度高(最低檢測(cè)0.1 pg/μl),線性范圍廣(如dsDNA檢測(cè)范圍0.2–100 ng)。
    • 特異性強(qiáng),避免傳統(tǒng)紫外法受雜質(zhì)(如酚類、鹽離子)干擾的問(wèn)題。
  1. 超微量分光光度計(jì)
  • 原理:基于朗伯-比爾定律,通過(guò)測(cè)量樣品在260 nm(DNA/RNA)、280 nm(蛋白質(zhì))等波長(zhǎng)處的吸光度計(jì)算濃度。
  • 優(yōu)勢(shì)
    • 樣品用量極少(最低0.3 μl),支持全波長(zhǎng)掃描(如UV-Vis檢測(cè))。
    • 操作簡(jiǎn)單,無(wú)需額外試劑,可同時(shí)檢測(cè)核酸純度(A260 /A280,A260 /A230)。
二、應(yīng)用場(chǎng)景差異
技術(shù)類型 典型應(yīng)用 適用場(chǎng)景
熒光計(jì) NGS文庫(kù)構(gòu)建前定量、稀有樣本(如microRNA)檢測(cè)、轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)前定量 需高精度、低樣本消耗的場(chǎng)景,尤其是下游實(shí)驗(yàn)成本高或周期長(zhǎng)的研究。
超微量分光光度計(jì) 常規(guī)核酸/蛋白質(zhì)定量、菌液密度檢測(cè)、污染物分析(如糖類、苯酚) 需快速篩查樣品濃度或純度的常規(guī)實(shí)驗(yàn),支持多波長(zhǎng)掃描(如UV-Vis、熒光)。
 
三、性能參數(shù)對(duì)比
指標(biāo) 熒光計(jì) 超微量分光光度計(jì)
靈敏度 0.01ng/μl(DNA) 0.5 μl樣品量,檢測(cè)上限可達(dá)37500 ng/μl(dsDNA)
線性范圍 0.2–100 ng(dsDNA) 0.75–37500 ng/μl(dsDNA)
雜質(zhì)干擾 特異性染料避免干擾 需通過(guò)A260 /A280,A260 /A230比值評(píng)估純度

四、選擇建議
  • 優(yōu)先選熒光計(jì)(達(dá)遠(yuǎn)辰光熒光計(jì)):當(dāng)樣本珍貴(如單細(xì)胞測(cè)序)、需高靈敏度或下游實(shí)驗(yàn)成本高時(shí)。
  • 優(yōu)先選超微量分光光度計(jì):常規(guī)核酸/蛋白定量、快速篩查或需多波長(zhǎng)檢測(cè)時(shí)。
發(fā)布者:深圳達(dá)遠(yuǎn)辰光科技有限公司
聯(lián)系電話:0755-86727654
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