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Moxi系列庫爾特細胞分析系統在PBMC檢測中的應用

瀏覽次數:833 發布日期:2024-5-15  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
外周血單個核細胞(Periphery blood mononuclear cell,PBMC)是外周血中具有單個核的細胞,包括淋巴細胞,單核細胞,漿細胞等(如圖1)。在機體免疫系統中,PBMC細胞扮演著重要角色,不僅參與免疫應答和免疫調節,還是抗體藥物研發、感染性疾病、惡性血液疾病、疫苗開發以及移植免疫等領域的研究原材料。

圖1. PBMC細胞的組成

外周血中,除了PBMC外,還有無核的血小板、成熟的紅細胞、多核的粒細胞等,其體積、形態和比重均不相同。因此,可用密度梯度離心法將各種細胞與PBMC分離開,如Ficoll密度梯度離心法,離心后比重較大的紅細胞和粒細胞沉于管底,PBMC漂浮于分離液表面(如圖2)。

圖2. PBMC細胞的分離

PBMC的質量非常關鍵,直接決定下游的實驗研究或治療方案如何推進。但是受限于技術方法,分離出來的PBMC難以避免會混有其他細胞,如紅細胞等。因此,對PBMC樣本進行精確的細胞計數、精準的細胞活率檢測,以確定細胞的質量尤為重要。

PBMC樣本的特殊性:1.樣本通常來自患者,數量有限,用盡可能少的檢測次數獲取到最真實的濃度數據;2.紅細胞與PBMC大小相近,難以通過肉眼區分;因此常規的計數方法對此類樣本均無法滿足要求。采用血球計數板的顯微鏡下人工計數方式,通常計數幾十個細胞,繼而推斷整個樣本濃度,其計數體系非常小,影響統計學準確性,同時細胞活率的判定依賴臺盼藍染色,人為主觀因素導致低準確性和低重復性。基于圖像法的自動細胞計數儀,通過自動化消除了一些不可靠性,但其原理與依賴圖像的血球計數方式相同,仍然存在低準確性和低重復性的問題。

為解決這種復雜細胞懸液的計數問題,需要加大計數體系,即計數更多的細胞,并避免對圖像的依賴。美國Orflo Technologies 公司的Moxi系列庫爾特細胞分析系統就是解決這一困難的利器,三個型號設備(Moxi Z,Moxi V和Moxi Go II)均采用細胞計數和體積測量行業的金標準——庫爾特原理,同時結合專利的微流控技術,對細胞樣本進行精準計數和體積測量。Moxi V和Moxi Go II還增加了流式熒光檢測模塊,實現對細胞樣本的熒光活率檢測及常規流式分析。設備一次運行,可在幾秒內完成數萬個細胞的計數及熒光檢測,計數體系大,不依賴圖像,對細胞樣本進行絕對計數和三維立體的體積測量,具備更高的準確性和重復性。

如圖3所示,是Moxi庫爾特細胞分析系統進行PBMC計數的結果,一次計數18000多個事件,包括細胞和碎片。通過體積門控設置,將<3μm處的碎片峰(紅色框)排除,確保輸出的濃度數據中只包括真實的細胞信息。

圖3: PBMC檢測結果

Moxi V和Moxi Go II在細胞計數和體積測量的基礎上增加了流式熒光檢測通道,預設有PBMC檢測程序,實現一鍵調用,10秒即可完成細胞計數、體積檢測及活率檢測,同時可提供紅細胞污染數據(圖4)。

圖4:PMMC預設程序檢測結果頁面
 

Moxi 系列產品采用庫爾特原理進行細胞計數和粒徑測量,其中高端型號配備流式熒光檢測通道,可進行細胞活率、細胞凋亡、轉染效率、活性氧簇、線粒體膜電位等常規流式檢測。儀器設計小巧輕便,無需預熱,開機即用,預設程序,觸屏操控,運行后10秒即可給出測試結果,使用后也無需清潔維護。無論是經驗豐富的實驗高手,還是初試身手的實驗小白,Moxi系統都可以助您輕松完成實驗。

環亞生物,生命科學產品全國性代理商,不斷把國外頂級的創新產品引入中國。環亞生物具備完善的公司運營、產品管理、營銷、售前技術支持和售后維修體系。環亞生物作為Orflo Technologies大中華區獨家代理商,負責Orflo Technologies產品大中華區的營銷和售后支持。

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