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為小鼠子孫滿堂助力--IVF VS 自然合籠

瀏覽次數:3353 發布日期:2019-11-11  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

同學們有木有經歷過小鼠繁殖了好幾代目標小鼠的數量卻一直達不到實驗需求的情況?遇沒遇到過實驗室某個傳了許多代的小鼠種群數量卻越來越少,最后只有一只獨苗的情況?

碰到這種自然繁育難題的時候,IVF(In vitro fertilization)技術就成為獲得更多小鼠和穩定種群的最佳方式。所謂IVF就是將雌雄配子在體外受精并植入假孕母鼠體內獲得子代小鼠的技術。

 

技術優勢

通常的自然繁育方式是自然合籠,與自然合籠繁殖相比,IVF具有以下幾個優勢:

其實IVF對自然合籠的優勢,我們從二者的繁育方案也能窺見一斑。以2對雜合子起始擴繁16對雜合子為例:

IVF方案


自然合籠方案

我們可以看到,通過IVF的繁殖方式,經過一輪繁殖只需要2對雜合雄鼠就可以得到目的數量的子代;而對比自然合籠方法,同樣兩只突變雄鼠,繁殖時間多了將近半年。因此,IVF 作為一種優秀的代養繁殖手段應用在多種繁殖項目中。

操作流程

說過了IVF的優勢,我們再簡單和大家聊聊IVF的操作流程。

 

IVF操作具體分四步:

體外受精用培養皿準備

實驗開始前一天在35 mm培養皿中加入2個200 μL TYH培養基液滴

精子的采集

(1) 將符合要求的性成熟(8周以上)的雄鼠頸椎脫臼處死,取出附睪上體尾部,去除脂肪與血跡后,置于一個TYH液滴內。

(2) 利用眼科剪在液滴內橫斷附睪尾,當精子充分游離出附睪尾后,將組織從液滴內取出,將培養皿置于培養箱。

 

圖1. 雄鼠取精操作

卵母細胞的收集

處死超排后的雌鼠,取出兩側的輸卵管,置入培養皿取出卵丘細胞團放入200 μL TYH培養基。

精卵混合

用10 μL移液器從精子滴吸取獲能后的精子,加到卵子液滴中,根據卵團大小情況以及精子的活力每滴加8 μL左右的精子。將精卵混合后,把培養皿置于培養箱中培養。

體外受精完成后將胚胎移入假孕母鼠子宮,21天后小鼠就會出生了。

圖2. 胚胎移植操作

今天的小鼠IVF的知識就跟大家聊到這里啦。百奧賽圖依托海門動物中心,致力于為您提供更好的實驗動物繁育服務,每年還會舉辦小鼠飼養、繁育培訓,手把手帶大家學習IVF、精子冷凍和胚胎移植等小鼠繁育技術,請大家多多關注哦。
 


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