志賀氏菌檢測新國標(biāo)厭氧條件增菌的解決方案

新頒國標(biāo)

2012年5月17日，中華人民共和國衛(wèi)生部頒GB 4789.5-2012《食品安全國家

標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 志賀氏菌檢驗(yàn)方法》，于2012年7月17日起實(shí)施。
該標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施之日起，原GB/T4789.5-2003標(biāo)準(zhǔn)作廢。 

解讀GB4789.5-2012
為了提高食品中志賀氏菌檢出率，降低操作者的操作要求，增菌過程的調(diào)整是本次新標(biāo)準(zhǔn)最大的變動(dòng)之處。 
兩份國標(biāo)方法之間增菌部分的主要區(qū)別如下表所示： 

	GB4789.5-2003	GB4789.5-2012
增菌培養(yǎng)基	GN增菌肉湯	志賀氏菌增菌肉湯-新生霉素
取樣操作	無菌均質(zhì)器或研缽	無菌均質(zhì)器或拍擊式均質(zhì)器
增菌培養(yǎng)條件	37℃，有氧培養(yǎng)6~8小時(shí)	41.5℃，厭氧培養(yǎng)16~20小時(shí)
……	……	……

更改增菌培養(yǎng)方式的最終目的是最大程度消除食物樣品中的雜菌背景對于檢測培養(yǎng)的影響。 
1、厭氧環(huán)境41.5℃培養(yǎng)，可排除需氧菌和大部分不耐熱的厭氧菌與兼性厭氧菌干擾；
2、使用志賀氏菌增菌肉湯-新生霉素進(jìn)行增菌，可排除革蘭氏陽性菌和部分革蘭氏陰性腸桿菌（如變形桿菌等）的干擾； 
減少雜菌背景的同時(shí)，也降低了雜菌在增菌過程中對于數(shù)量很少的志賀氏菌的競爭抑制作用，可有效地提高志賀氏菌的擴(kuò)增量，有助于進(jìn)一步的分離與鑒定。

厭氧增菌的解決方案
不同于常規(guī)厭氧培養(yǎng)，本標(biāo)準(zhǔn)中的增菌培養(yǎng)是在無菌三角燒瓶或無菌勻質(zhì)袋中進(jìn)行，故厭氧袋因容積限制而無法使用，因此推薦以下專業(yè)解決方案：

解決方案一：每日樣品檢測量30~50份的實(shí)驗(yàn)室，建議配備AG300型厭氧工作站。
型號(hào)           AG300
最大培養(yǎng)容量： 50只（250ml標(biāo)準(zhǔn)三角燒瓶）
              30只（500ml標(biāo)準(zhǔn)三角燒瓶）
傳輸艙容量：   2只（250/500ml標(biāo)準(zhǔn)三角燒瓶）
（* 三角燒瓶底徑需小于100mm，高度小于200mm）
 
解決方案二：
每日樣品檢測量極少（≤30份）的實(shí)驗(yàn)室，A30厭氧培養(yǎng)系統(tǒng)，此方案需要將厭氧罐放入生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
型號(hào)           A30厭氧培養(yǎng)系統(tǒng)配20L培養(yǎng)罐
最大培養(yǎng)容量：  20只（250ml標(biāo)準(zhǔn)三角燒瓶）