市場上的藥品及其代謝物的含量水平的測定對新療法的開發來說非常重要。體液中的藥物水平被用來確定藥物的生物利用率。此外，藥物代謝物信息的解析也至關重要，因為在一定濃度水平下，這些代謝產物是有毒性的，且比原型藥具有更強的藥效活性，干擾輔藥，進而影響肝臟功能。這兩塊信息通常是從不同的分析實驗中獲取得到的，這加重了實驗室的工作負擔，降低了實驗室的工作效率。因此，如果通過一次分析就能獲得藥物濃度、獲取代謝物結構有關信息話，這種方式速度更快，也能節約更多成本。樣品數量較少的情況下，比如說，在兒科研究中，這種能力對實驗室獲取必要的定量和定性數據至關重要。沃特世Xevo^TM TQ MS是一套串聯四極桿質譜系統，裝配有新型設計的碰撞池，可以通過一次分析過程中獲取全掃描質譜和定量的多反應監測（MRM）的數據。下面我們提供一種一次分析就可獲取全掃描質譜和多反應監測質譜數據的數據采集方法，并以此測定尿液中藥物樣品的含量，并利用相關全掃描數據來檢測其相關的代謝產物。

 

下面我們提供一種一次分析就可獲取全掃描質譜和多反應監測質譜數據的數據采集方法，并以此測定尿液中藥物樣品的含量，并利用相關全掃描數據來檢測其相關的代謝產物。

 

 

尿液是從服用400毫克布洛芬八個小時之后志愿者上采集的。樣品進樣分析之前冷凍保存。樣品的制備是樣品以13000RCF的速度離心5分鐘，然后用水進行稀釋，再把樣品注入UPLC/MS/MS系統中。

 

 

測定藥物的濃度和藥物的代謝產物是新藥研發過程的兩個重要方面。設計本實驗的目的是：在依次進樣中，用多反應監測質譜來測量尿液中的布洛芬的含量，用采集全掃描質譜數據來檢測相關的代謝產物。Xevo TQ MS的碰撞池不斷的沖入碰撞氣，其獨特的碰撞池設計使得該儀器可以在MS和MS/MS數據采集過程中實現快速的切換。這個過程出現在與ACQUITY超高效液相色譜系統產生的快速色譜和其產生的窄色譜峰相一致的時間范圍內：XevoTQMS能夠在10000Da/sec的采集速率下進行操作，并能準確的對UPLC產生的非常窄的色譜峰進行歸屬。在本組數據中，采集到了大于12次的MRM掃描圖，同時也獲取了全掃描質譜數據。在峰底處測得的色譜峰寬度在2.4秒。（數據未顯示）。圖2表示的是布洛芬的及其主要的體內代謝產物的化學結構式。圖3顯示了尿液樣品中的布洛芬多反應監測數據以及同時獲取得到的的全掃描數據。全掃描數據用來尋找布洛芬產生的可能的代謝產物。圖4顯示了的與酮葡萄糖苷酸（m/z411）、葡萄糖苷酸（m/z 381）以及氫氧根葡萄糖苷酸（m/z397）相關代謝產的提取離子色譜圖（XIC）。　進一步的碎片離子質譜確認實驗揭示了幾個診斷碎片離子，例如：與葡萄糖苷酸部分相關的m/z 193和175，糖苷配基m/z 221，布洛芬本身的m/z 113（圖5）。這種獲取方法更深一層的優勢在于能夠讓科學家們用全掃描質譜更形象的觀察到主體基體之間的差異。這些差異可能與多個因素有關：飲食、性別、年齡以及個人的健康狀況。因此，完整掃描數據還用于生物標記物的檢測。而且，如果將來需要關于化合物代謝機理的新的信息時，我們還可以檢查全掃描數據，而不需要對樣品重新進樣分析。

 

 

在本應用文獻中，我們已經說明：Xevo TQ MS能夠同時進行全掃描和MRM的數據采集，從而可以單次進樣測定尿液中的藥物成分的含量并研究其代謝物的相關信息。事實證明，

Xevo TQ MS的采集速度與高效分離的ACQUITY超高效液相色譜系統是高度兼容的。該項技術的優勢體現在多個方面。首先，同時采集全掃描數據和MRM數據，因此科學家們便可以一次性采集有關樣品的多維數據，充分利用實驗室資源。否則，需要進行數次實驗才能獲取同樣的信息。其次，將該項MS技術與超高效液相色譜結合，有效提高了分析速度。最后，由于全掃描MS獲取的數據較為全面，能夠以更多方式加以利用，同時讓研究人員在指導藥物發現和開發研究時對自己的決策更有信心。

 

[1]Plumb R,Rainville P.,et al.Rapid Communications in Mass Spectrometry.2007;21:4079-85

 

 

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