如何選擇適合的外泌體提取方法詳解

瀏覽次數：756　發布日期：2023-9-7　來源：本站　僅供參考，謝絕轉載，否則責任自負

超速離心法、尺寸排阻分離法、超濾法，還有沉淀法，面對眾多的外泌體分離方法，究竟怎樣確定哪種方法是最適合后續實驗分析呢？

梅奧醫學中心的科研工作者們利用糞便上清分離胞外囊泡（EV），用于結直腸癌早期診斷。他們評估了五種EV分離方法（超速離心[UC]、沉淀[EQ -O、EQ-TC]、尺寸排阻分離柱[SEC]和超濾[UF]）的總回收率、重現性、純度、RNA組成和糞便上清液中的蛋白質表達。

為了估計EV的直徑，研究人員使用Apogee Micro-Plus納米流式細胞儀獲取散射光數據，并將每個珠群的側散射強度轉換為納米，獲得EV的直徑。為了測量EV分離/富集方法的回收效率，他們比較了分離/富集前后五個糞便樣本的顆粒數，觀察到超濾和尺寸排阻分離柱是回收顆粒的最有效方法。

通過Western blot分析發現超速離心法和尺寸排阻分離柱獲得更高的顆粒與蛋白比。根據提取的RNA純度的分析顯示，尺寸排阻分離柱是最--好的EV分離方法。

研究人員在測試的五種技術中，認為尺寸排阻分離柱是基于回收率和純度參數的最適合糞便上清液的EV分離方法。在未來，該方法可用于研究糞便衍生的EVs，作為生物標志物的潛在來源，以提高結直腸癌變之前的檢測。

qEV尺寸排阻分離柱是由新西蘭IZON公司研發和生產的一種基于尺寸排阻色譜法（Size Exclusion Chromatography, SEC）原理的外泌體分離-純化技術。該技術具有簡便、快速、容易標準化操作的特點，只需要15min就可以從多種類型樣本中提取到完整的高純度外泌體。相較于其他方法，qEV所提取的外泌體純度更高、濃度更高、活性也更高，還可以重復使用。qEV分離的外泌體尤其適用于外泌體蛋白組和外泌體功能實驗。

Apogee Micro-Plus納米流式細胞儀（nFCM）可以分辨尺寸范圍為80nm至1300nm的聚苯乙、烯和二氧化硅微球，專門為檢測納米級小顆粒設計，非常適合細胞外囊泡、外泌體、大病毒和納米顆粒的分析，能快速獲取樣本中細胞外囊泡的尺寸信息，準確濃度以及生物標志物的表達。

純度高，活性好的樣本是細胞外囊泡功能分析的基礎，檢測速度快，準確度高是分析細胞外囊泡的有力工具，歡迎前來伯齊科技咨詢qEV尺寸排阻分離柱和Apogee納米流式細胞儀。