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大小鼠傳統T型迷宮的實驗方法

瀏覽次數:1039 發布日期:2022-5-12  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

近半個世紀前,Kivy和Dember等人證明大鼠能辨別T-形迷宮(T-maze)兩臂顏色的變化。他們發現,將雄性大鼠置于T-形迷宮的主干臂15~30min,讓其能看見、但不能進入黑白兩臂。然后,改變其中一個臂的顏色,使兩臂同為黑色或白色。讓大鼠自由選擇T-形臂。結果顯示,大鼠總是選擇改變了顏色的那個臂(新異臂)。這一過程要依靠動物的記憶來完成。由此發展而成的T-形迷宮實驗成為目前用于評價空間記憶的最常用的動物模型之一。當然,現在的T-形迷宮使用的是食物而不是臂的顏色作為動物探究的動力。通常用這一模型來研究動物的空間工作記憶(spatial working memory),即測定動物只在當前操作期間有用的信息。經改進后的T-形迷宮也可用來評價參考記憶(reference memory),即記錄在這一實驗中任何一天、任何一次的測試都有用的信息。

(一)實驗設備

這里介紹上海欣軟信息科技有限公司的大鼠T-形迷宮。迷宮由兩個長46cm、寬10cm、高10cm的目標臂(goal arms)和一個與之垂直的長71cm、同樣寬度和高度的主干臂(stem)或起始臂(approach alley)組成。主干臂內置一個16cm*16cm的起始箱,并有一閘門與主干臂的另一部分相聯。實驗用雄性成年大鼠。飲水不限,但進食控制在每天16~20g,以使體重保持在非進食大鼠體重的85%。在整個訓練和測試期間,大鼠體重每周增加不超過5g。

(二) 實驗方法

這里介紹傳統T-形迷宮實驗和T-形迷宮自主交替實驗。

1、傳統T迷宮實驗

(1)適應 在T-形迷宮臂內分撒6粒食丸(45g),讓大鼠適應迷宮5min,每天一次,連續5天。

(2)強迫選擇訓練 將大鼠放入主干臂的起始箱,打開閘門,讓大鼠進入迷宮的主干臂。隨機、交替選擇左右兩臂之一放入4粒食丸,同時關閉另一臂,使動物被迫選擇食物強化臂并完成攝食;每天6次,連續4天。

(3)延遲位置匹配(delayed matching-to-position,DMP)訓練

1)將動物放入閘門關閉的起始箱,打開閘門,讓動物進入主干臂。

2)關閉一側目標臂,強迫動物進入另一側開放臂以獲得2粒食丸獎賞。

3)立即(最短延遲,少于5s)將動物放回主干臂,開始匹配訓練中的第二次訓練;此時兩個目標臂均開放。動物將兩前肢和至少兩后肢的一部分置于一個目標臂時完成“一次選擇”。動物返回到強迫選擇訓練時進入過的臂則獲得食物獎賞(4粒食丸),記錄一次正確選擇;若動物進入另一臂,則沒有食物獎賞,并且將其限制在該臂內10秒,記錄一次錯誤選擇。

4)一次匹配訓練結束后將動物放回籠內5~10min(與此同時訓練其他動物),再重復下一次匹配訓練。每天8次。

動物連續兩天的正確選擇次數達到15/16,則認為達到標準,可以開始實驗。如動物經過30天訓練仍然達不到標準,則予以淘汰。

5)動物訓練達標后一天,給予一次匹配訓練。所不同的是,強迫選擇訓練后,將T-形迷宮旋轉180度,再進行上述開放臂的訓練。這樣做的目的是評價動物是否為定位性操作(有賴于迷宮外信號)或反應性操作(不依賴迷宮外信號)。

6)接著兩天,每天給予10次匹配訓練,每次訓練間隔為60s,用以評價動物的工作記憶操作。記錄進入食物強化臂的次數和再次進入非強化臂的次數。后者被認為是工作記憶錯誤。正常健康年輕的大鼠幾乎每次均能準確操作。當操作穩定、且選擇準確率高(工作記憶錯誤少于10%)時,可進行藥物測試或腦區毀損后的操作實驗。

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發布者:上海欣軟信息科技有限公司
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