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從引進小鼠到繁育過程的詳細攻略介紹及注意事項

瀏覽次數:1389 發布日期:2024-12-19  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

很多同學在課題進展到一定狀態后,都會需要小鼠來開展后續實驗。但面對著珍貴實驗鼠鼠時,新晉鏟屎官們常常手足無措,無從下手。小鼠狀態越來越差不說,甚至出現斷種的情況。

既然想要成為一個合格的鏟屎官,就該盡早做好準備。今天鼠博士就給大家講述引進小鼠時需考慮的幾大問題。建議每個新晉鏟屎官都收藏一下~

 


引進小鼠前
確定小鼠類型:
  • 明確小鼠背景:常見近交系小鼠品系有C57BL/6(毛色為黑色) 、BALB/c(毛色為白色)、FVB(毛色為白色)、ICR(毛色為白色)等

  • 明確小鼠類型:小鼠為野生型小鼠、無菌鼠還是基因編輯小鼠,小鼠免疫系統是否健全等。

確定小鼠飼養環境:

  • 詢問小鼠來源機構(實驗室/供應商)小鼠合適飼養環境。根據國務院批準的《實驗動物管理條例》,按照相應的微生物控制標準,實驗動物分為四級:一級,普通級動物 conventional (CV) animal;二級,清潔級動物clean (CL) animal;三級,無特定病原體級動物specific pathogen free (SPF) animal;四級,無菌級動物germ free (GF) animal。

  • 確認小鼠合適飼養環境后,聯系動物房/動物中心詢問相應等級小鼠如何引進,按照不同單位各自流程辦理引入外來小鼠流程。

  • 根據引入小鼠類型與數量,提前準備好合適的籠位數

水和食物的供應:

  • 根據小鼠與實驗需求,準備好合適的飼料與水。

  • 飼料:常規小鼠使用常規生長繁殖飼料即可(脂肪含量為6%),其他特殊情況視情況而定。飼料需滅菌,滅菌方式可選擇高溫高壓滅菌、輻照滅菌等。

  • 飲用水:可使用pH2.5-3.0的酸化水、高壓無菌水、純化水等。

 


引進小鼠時:
確定小鼠基本信息:

  • 了解小鼠編號標記的方法,便于準確辨認小鼠:
    (1) 斷趾編號法:斷趾法是最常見的編號方法,根據對新生小鼠前肢 4 趾,后肢 5 趾的切斷位置來進行編號。

    (2) 耳標法:用專門的耳孔機在小鼠耳朵上打孔或造成缺口,或者用剪刀在耳朵邊緣剪出不同的缺口進行編號。
    (3) 染色法:用毛筆或棉簽蘸取化學藥品,在實驗動物體表不同部位涂上斑點,以示不同編號。常用染液有:3–5% 的苦味酸溶液(黃色);0.5% 的中性品紅溶液(紅色);2% 的硝酸銀溶液(咖啡色)。

  • 檢測小鼠編號、數量、性別、周齡、基因型等基本信息是否與標簽相符。

觀察小鼠基本情況:

  • 皮毛:有無光澤、豎毛、出血、污物、脫毛。
  • 眼:有無分泌物、流淚、白內障、角膜損傷。
  • 口腔:有無流涎、出血。
  • 耳:有無外傷、耳殼曲折、耳部炎癥。
  • 四肢:有無外傷、彎曲、脫臼、腫脹、關節炎癥。
  • 肛門:有無排泄殘留物、血便、脫肛。
  • 精神和食欲:沉默、倦怠、動作不活潑、食欲不振、拒食。
  • 營養狀況:消瘦、過度肥胖、成長異常。
  • 姿勢和步態:姿勢異常、行走和站立困難、運動失調、跛行。

穩定小鼠狀態:

  • 小鼠在引入后需經過環境適應期3-5天后,方可進行實驗操作。
  • 盡量減少噪音、振動、氣味干擾,輔助小鼠盡快適應新環境。

復核小鼠基因型

  • 詢問小鼠來源機構(實驗室/供應商)小鼠基因型具體檢測方案,購買相應試劑
  • 將引進小鼠剪尾,復核基因型,明確小鼠信息,同時檢驗基因檢測方案是否可行。

引進小鼠后:
明確目前實驗需求

  • 需要快速使用小鼠進行實驗(訂購野生型、動物造模模型或大量單一基因型小鼠)
  • 需要大量獲得某種基因型小鼠,小鼠處于被積極使用狀態。(訂購繁殖對自行繁殖)
  • 需要維持品系但不擴大其規模,小鼠處于維持狀態。

設計繁育策略并制定種群管理計劃

  • 向小鼠來源機構(實驗室/供應商)了解小鼠繁育特征。小鼠的基本繁育信息可見下表:

  • 繁育策略設定:根據基因小鼠的類型,參考下面方式,制定繁育籠配繁策略。

(更詳細的繁育攻略,可閱讀往期推文:【小鼠大學問】養小鼠你要知道的那些事(三):基因工程小鼠繁育方案)

  • 種群管理計劃制定:根據實驗小鼠是被積極使用狀態還是維持狀態制定繁育籠數

若小鼠是被積極使用狀態,盡量使目標基因型的比率保持在 1/8 (12.5%) 或更高,并且根據小鼠所需數量,結合懷孕率、 產仔數、 性別、基因偏差等因素計算出所需籠位數。


(更詳細的方案計算攻略,可閱讀往期推文:從0到1:手把手教你設計繁育方案)

若小鼠是維持狀態,保持至少兩代小鼠,每代包括兩到三對姐妹兄弟的繁殖。在新一代的小鼠被證明有生育能力之前,不要淘汰任何年老繁殖對。并且需要密切監測繁育性能。除此之外,可考慮對實驗所用小鼠品系進行冷凍保存,便于保存遺傳特性,避免育種失敗等問題發生。

小鼠繁育Tips:
根據繁育策略建立好繁育籠后,還是會出現各種各樣的問題影響小鼠繁育,遇到問題時可參考下表進行改善:

記錄種群信息:
開始飼養小鼠后,小鼠的信息記錄對于種群管理非常重要,主要在于籠卡與飼養記錄表。

  • 籠卡分為飼養籠與繁殖籠,兩者包含信息見下表:


參考如下

 
  • 飼養記錄:

除了籠卡以外,我們還要用表格把所有的小鼠情況匯總記錄下來,可以包括小鼠的編號、出生日期、代次、性別、基因型信息、親代小鼠信息、交配日期、目前狀態、體重信息等等,便于統計與管理。


小鼠基因型鑒定
小鼠基因組鑒定也是常常困擾新晉鏟屎官的點,鼠博士這邊的建議是,首先按照小鼠來源機構(實驗室/供應商)小鼠基因型具體檢測方案來執行,若還有一些問題,可以參考下表進行改進。


希望這篇文章可以對新晉鏟屎官的你能有所幫助,不用走太多彎路!如果您還有這方面的疑問,隨時歡迎您聯系我們!

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