01 多領(lǐng)域常用的動物實驗?zāi)Ｐ蛥R總
● 疾病模型，比如神經(jīng)&肌肉、眼科、新冠等疾病模型的構(gòu)建原理、細分差異。
● 工具鼠，比如工具鼠的類型、作用、選擇要點、具體特性等。
● 腫瘤免疫模型，比如如何選擇免疫缺陷小鼠、人免疫系統(tǒng)重建小鼠以及它們的異同之處。

02 大小鼠模型構(gòu)建原理、建系流程
● TurboKnockout技術(shù)，TurboKnockout基因敲除及基因敲入小鼠技術(shù)原理及應(yīng)用。
● CRISPR-Pro基因編輯，技術(shù)原理、技術(shù)優(yōu)勢、載體構(gòu)建的流程周期等。
● 轉(zhuǎn)基因大小鼠，比如PiggyBac(PB)系統(tǒng)的表達機制、建系流程、動物品系的選擇等。

03 解答養(yǎng)鼠過程中經(jīng)常遇到的多類問題
● 繁殖生理，比如大小鼠的生長發(fā)育時間點，如何辨別大小鼠的性別等。
● 小鼠繁育，比如不同類型的基因編輯鼠該如何建系，大小鼠脫毛、打架等問題該如何解決。
● 品系鑒定，比如如何選擇 PCR 反應(yīng)體系，各種類型的基因編輯鼠該如何鑒定等。
 

▼下面展開干貨問答▼

Q1: 常用的腫瘤研究疾病模型？
在腫瘤藥物開發(fā)研究過程中，通常使用免疫缺陷模型作為腫瘤異種移植（CDX/PDX）的宿主。賽業(yè)生物可為腫瘤藥物研發(fā)人員提供一系列免疫缺陷程度不同的免疫缺陷動物模型，從缺失 T、B 細胞的 NOD-Scid 到缺失 T、B、NK 細胞的免疫缺陷程度極高的C-NKG小鼠，可支持不同人源腫瘤類型的異種移植（CDX/PDX），為國內(nèi)腫瘤藥物的臨床前研發(fā)提供有力支持。

Q2: TurboKnockout基因打靶技術(shù)技術(shù)原理？
建立在傳統(tǒng)基因打靶技術(shù)之上的TurboKnockout基因打靶技術(shù)，不僅具有傳統(tǒng)ES打靶技術(shù)成熟、修飾準(zhǔn)確、效果穩(wěn)定等優(yōu)點，更是使得傳統(tǒng)ES打靶技術(shù)減少兩代繁育時間，制作周期縮短至僅需6個月。

Q3: 如何判斷大小鼠的性別？
性別判斷 ：
雄鼠外生殖器與肛門之間的距離長，兩者之間有毛生長；雌鼠外生殖器與肛門之間的距離短，兩者之間無毛，能見到一條縱行的溝。識別要點：
①雄鼠的生殖器距肛門較遠，雌鼠較近。
②雄鼠生殖器與肛門之間長毛。
③雄鼠的生殖器突起較雌鼠大。
④雌鼠有5對乳頭，雄鼠沒有。

Q4: 如何選擇種鼠？
配種前需檢查種鼠健康狀況，如毛發(fā)是否光亮順滑、生殖器是否正常、體型是否健壯、五官是否有異常分泌物、精神狀態(tài)是否正常、雌鼠是否有雙陰道、爪號或者耳號是否正確等。

種鼠應(yīng)從性能最好的配種對的后代中挑選，并且注意從“最近”生產(chǎn)的窩中挑選。選擇體質(zhì)強壯、被毛緊披有光澤、肥瘦適中、四肢有力、反應(yīng)敏捷、外生殖器發(fā)育良好、眼鼻無異物、無外傷腫脹潰爛、肛門干凈、糞粒均勻的小鼠。

Q5: 大小鼠不孕怎么辦？
合籠之后發(fā)現(xiàn)大小鼠不孕，可以從以下幾點考慮：
1.雌鼠配種的年齡是否過大？C57BL/6建議是雌雄鼠都是8周以上，其他常規(guī)品系6周以上即可。體重是否正常？外生殖系統(tǒng)是否正常？年齡太小或太大的雌鼠、體重太重或太輕的雌鼠會比較容易難產(chǎn)。另外，第一胎的母鼠一般生產(chǎn)效果都不太好，可以嘗試拿有生育過的母鼠去配種，這樣出生效果可能會好一些，或者有條件的話可以更換一批雌鼠再配種。

2.選擇陽性雄鼠與健康野生型雌鼠去交配，以期獲得有受孕成功的雌鼠，如果長時間未懷孕，判斷可能是雄鼠的問題。

3.個別小鼠出現(xiàn)不孕現(xiàn)象是有可能的，如果是多只小鼠出現(xiàn)不孕，需要考慮是否為基因?qū)ι�育的影響�?/span>

4.陰栓可以作為交配成功的指標(biāo)，但是不能代表受孕，因為見栓不一定受精。