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重組胰蛋白酶在醫藥開發、生化研究及疫苗生產中的應用

瀏覽次數:648 發布日期:2024-4-15  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

Trypelectase 重組胰蛋白酶是逐典生物專門為疫苗、病毒載體生產設計,具有高效、非動物源和高質量標準的特點。該胰蛋白酶氨基酸序列與豬胰腺來源的胰蛋白酶一致,由大腸桿菌(E.col) 重組表達生產。在GMP級別環境中生產的重組胰蛋白酶能高效消化貼壁細胞且不造成傷害,產品質量滿足藥典要求。
 

一,在醫藥開發、生化研究領域中的應用

在生化研究方面,重組胰蛋白酶可分析蛋白質結構、氨基酸序列;

在醫藥領域,由于重組胰蛋白酶會選擇性水解賴氨酸、精氨酸肽鏈,因此可用于治療各種炎癥、潰瘍、癬疥、水腫、血腫等疾病,并能夠促進抗生素等藥物向病灶滲透。重組胰蛋白酶制劑主要是注射用胰蛋白酶,可用于外科炎癥、肺氣腫、支氣管炎、創傷性損傷、毒蛇咬傷等治療領域。
 

 


二,在疫苗生產中的應用

疫苗是目前預防疾病發生和傳播最為有效的方式,主流生產疫苗的主要方法有:雞胚培養系統和動物細胞培養系統。
 

目前使用最為廣泛的是動物細胞培養系統,動物細胞在適宜環境下能夠迅速增殖,并且由于其與人體組織細胞極為相似,故而其生產的疫苗具有很高的免疫原性。傳統的雞胚培養疫苗系統則存在許多不足之處,比如培養的病毒容易發生變異;與人群流行病毒株存在差異導致疫苗效果不佳或無預防效果;病毒大范圍傳播時健康雞胚供應受限致使短時間內無法滿足對疫苗的需求。
 

1、用于疫苗生產中細胞培養時的細胞解離

貼壁依賴型動物細胞在培養時都是貼附于固相表面進行生長,一般貼附于培養器皿表面或微載體,我們稱之為貼壁培養。在細胞培養的過程中,需要使用細胞消化液對貼壁細胞進行處理,使之成為單個細胞并且不對其造成損傷,其中酶類細胞消化液主要成分為蛋白水解酶和緩沖保護溶液。
 

當前市場上所售以重組胰蛋白酶消化液為主,重組胰蛋白酶能夠水解細胞間的沾粘蛋白,釋放出單個獨立細胞,并且很好的保持細胞的完整性和細胞活性。

 


2、用于疫苗生產中裂解病毒

以細胞培養系統培養的流感病毒血凝素HA為例:流感病毒血凝素HA被宿主蛋白酶裂解為成熟的HA1和HA2后才能夠介導病毒囊膜與靶細胞融合,開始病毒生命周期,因此HA的裂解成為病毒感染細胞的首要因素,因此可以采用外加重組胰蛋白酶的方式進行裂解,以進行病毒疫苗的生產,其可有效的提高病毒產量,從而進行大規模的生產并簡化相關生產工藝。


3、用于消除疫苗生產過程中可能造成的生物危害

當前基因工程疫苗是國際社會生物安全管理的一個集中點,在基因工程疫苗的研制過程中,經過基因重組而攜帶外源基因的生物體一旦逃逸到環境中,經過基因整合后,可能會引起生態系統的結構發生改變,打破其在長期進化過程中所形成的生態平衡,威脅自然界中的生物,有些病毒具有導致靶組織損傷的基因,可能使原本無害的微生物變得極其危險。


三,逐典重組胰蛋白酶特點

1.GMP級生產環境、符合藥典標準

2.重組生產、不含雜酶

3.批量生產、質量穩定

4.高純度、高比活

5.非動物源原料


實驗數據

CT26.WT 和 HEK293FT 細胞消化實驗

CT26WT和HEK293FT在經Trypelectase重組胰酶消化3min后解離效果較好,細胞活率顯示對細胞傷害較小,不會影響細胞傳代。

 

Trypelectase重組豬胰酶對細胞消化過程及傳代24h細胞貼壁圖

發布者:上海瑋馳儀器有限公司
聯系電話:18521301252
E-mail:xiaojing.su@weichilab.com

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