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彗星試驗試劑盒助力體外遺傳毒性研究

瀏覽次數:1084 發布日期:2024-4-9  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
體內堿性彗星試驗在化合物遺傳毒性評價中的應用日益廣泛。ICH S2(R1) 已將肝臟彗星試驗列為第 2 個組織/終點的體內試驗;體內哺乳動物堿性彗星試驗的指導原則(TG489)也已頒布。體內堿性彗星實驗能夠檢測 DNA 鏈斷裂、堿性不穩定位點、不完整切除修復引起的 DNA 鏈的斷裂,能夠制成合適細胞懸液的組織 DNA 損傷。與其他試驗相比其檢測的是單細胞水平的 DNA 損傷,因此該試驗敏感性較高,操作簡單,經濟省時。

一、彗星試驗原理

彗星試驗(Comet Assay),亦稱單細胞凝膠電泳試驗,是一種通過檢測DNA鏈損傷判斷遺傳毒性的技術。它能有效地檢測并定量分析細胞中DNA單、雙鏈缺口損傷的程度。當各種內源性和外源性DNA損傷因子誘發細胞DNA鏈斷裂時,其超螺旋結構受到破壞,在細胞裂解液作用下,細胞膜、核膜等膜結構受到破壞,細胞內的蛋白質、RNA以及其他成分均擴散到細胞裂解液中,而核DNA由于相對分子質量太大只能留在原位。

在中性條件下,DNA片段可進入凝膠發生遷移,而在堿性電解質的作用下,DNA發生解螺旋,損傷的DNA斷鏈及片段被釋放出來。由于這些DNA的相對分子質量小且堿變性為單鏈,所以在電泳過程中帶負電荷的DNA會離開核DNA向正極遷移,從而形成彗星狀圖像,而未受損傷的DNA部分則保持球形。因此,可根據電泳緩沖液PH值不同,進一步分為中性彗星試驗(PH=8.4)和堿性彗星試驗(PH>13),前者主要用于檢測DNA雙鏈的斷裂損傷,后者則具有更高的靈敏性,可用于檢測更少量的單鏈和雙鏈的斷裂損傷。

通常,DNA受損越嚴重,其產生的斷鏈和斷片就越多,長度也越小,在相同電泳條件下遷移的DNA量就越多,遷移距離也越長。因此,可通過測定DNA遷移部分的光密度或長度來判定單個細胞的DNA損傷程度,從而確定受試物的作用劑量與DNA損傷效應的關系。

陰性對照
 
陽性對照

二、相關產品

IPHASE作為體外研究生物試劑引領者,針對堿性彗星試驗成功開發彗星試驗試劑盒及其相應載玻片,省去了客戶溶液配制時間,大大縮短了試驗周期,且試劑盒各組分均經過嚴格的質量檢測和多次試驗驗證,符合堿性彗星試驗要求。
 
產品名稱               規格
彗星試驗試劑盒         20/50 Test
彗星試驗載玻片,2孔    2/25 張
 



便捷性
提供單細胞凝膠電泳所需試劑和耗材,可以直接使用,大大縮短了實驗周期。

準確性
試劑盒各成分均經過嚴格的質量檢測,實驗結果準確、可靠、重現性高。

穩定性
本試劑盒穩定性強、易于運輸和保存。

應用廣
應用范圍廣,可用于食品、化學品、農藥、消毒劑、食品添加劑、化妝品、醫療器械等多個方面的遺傳毒理學檢測。

IPHASE/匯智和源憑借多年的研發經驗,推出了多領域、多種類的高端科研試劑,為藥物早期研發提供篩選工具,為生命科學領域的探索提供新材料、新方法和新手段,為遺傳毒性研究提供便捷產品。此外,IPHASE/匯智和源可提供特殊產品的定制服務,望廣大科研工作者來電咨詢,咨詢熱線400-127-6686。

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匯智和源,致力于為創新藥研發企業及生命科學研究機構提供高品質的生物試劑,IPHASE為公司核心品牌,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research”。
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