基于細胞的分析(Cell-based assay)需求越來越大,因為與生物化學分析相比,其能夠更好地反映生物系統(tǒng)的復雜性。這種分析已在生命科學研究和藥物發(fā)現(xiàn)中發(fā)揮重要作用,用于了解基因、蛋白質或全細胞功能及其控制機制。
基于細胞的分析在各類實驗和應用中都有用武之地,從基本的細胞功能或細胞和病原體的相互作用,到細胞構建體的檢測(緊密模擬體內環(huán)境)。在進行動物和人體試驗之前,基于細胞的分析對于篩選潛力候選藥物和臨床前測試、確定潛在的不良反應(如細胞毒性)以及提高先導化合物的效率提升也是至關重要的(圖1)。
圖1. 基于細胞的分析可檢測的細胞過程舉例
基于活細胞的分析尤為重要,可利用活細胞對途徑、機制或相互作用進行研究,例如細胞特異環(huán)境中的細胞活性或基因表達。在生物化學分析中,重組蛋白或細胞裂解液分析是在細胞環(huán)境之外進行的,相比而言,使用活細胞可以更準確地反映整個生物體的情況。
利用酶標儀進行基于細胞的分析
酶標儀為基于活細胞的分析提供了關鍵優(yōu)化功能。使用微孔板可減少每次測定的試劑體積和細胞數量。酶標儀也有助于提高通量、優(yōu)化流程,還能夠分析同一樣本中的多個參數(多路復用)。
基于活細胞的分析對環(huán)境條件高度敏感,特別是在細胞動力學實驗中,這對酶標儀構成很大的考驗。目標是盡可能在酶標儀中模擬生理條件,避免將培養(yǎng)皿在培養(yǎng)箱和酶標儀之間拿來拿去。為此,需要在酶標儀中對CO2和O2水平進行監(jiān)測和控制。
大氣控制單元
BMG LABTECH的酶標儀CLARIOstar®Plus、VANTAstar®和Omega系列可配備大氣控制單元(簡稱ACU)。ACU幫助研究人員準確地在微孔板中模擬生理條件,并得出更精確的數據(圖2)。
圖2. 大氣控制單元(ACU)
ACU可對CLARIOstar®Plus、VANTAstar®和Omega系列酶標儀內部的O2和CO2氣體水平進行獨立調節(jié),為各類活細胞分析提供所需的最佳環(huán)境(圖3)。在測定過程中,氣體水平可以在設定的時間增加和降低,使體外進行的基于活細胞的分析得到優(yōu)化。與溫度控制相結合,ACU為長期進行的分析提供了不用操心的“甩手”解決方案。
圖3. CLARIOstar®Plus、VANTAstar®和Omega系列與ACU模塊兼容
氣體斜坡控制
這項獨有的功能,使CLARIOstar Plus可實現(xiàn)O2和CO2分壓的斜坡控制。例如,在保持穩(wěn)定CO2分壓條件下,ACU可將氧氣抽離后快速復氧,還原到生理條件(圖4)。這一功能實現(xiàn)了在酶標儀上構建可重建型的活細胞研究環(huán)境,例如缺血/再灌注疾病模型。
圖4. 配備ACU的CLARIOstar Plus酶標儀中的缺血/再灌注大氣條件示例。O2濃度迅速降低到0.2%,然后在CO2水平保持穩(wěn)定的同時恢復到室內濃度
轉載自BMG LABTECH
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