Caco-2細(xì)胞分離自一名72歲男性的直腸原位癌細(xì)胞，當(dāng)長(zhǎng)到滿時(shí)表現(xiàn)出特征性的腸上皮細(xì)胞分化。因此，Caco-2細(xì)胞模型是十幾年來(lái)國(guó)外廣泛采用的一種研究藥物小腸吸收的體外模型，具有相對(duì)簡(jiǎn)單、重復(fù)性較好、應(yīng)用范圍較廣的特點(diǎn)。

表1 Caco-2細(xì)胞基本信息
 

圖1 Caco-2（人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞）
 

首先，我們要討論的第一個(gè)問(wèn)題是如何判斷細(xì)胞狀態(tài)好不好？為了更直觀地了解細(xì)胞狀態(tài)，我們可以看一下如下圖2和圖3。正常的Caco-2細(xì)胞呈島狀生長(zhǎng)，細(xì)胞間連接緊密，細(xì)胞群的邊界光滑，細(xì)胞群中常常含有巨大的空泡（屬于正�，F(xiàn)象）。

圖2 Caco-2正常形態(tài)

圖3 Caco-2正常形態(tài)
 

接下來(lái)，我們討論第二個(gè)問(wèn)題是該細(xì)胞消化難問(wèn)題。該類細(xì)胞間連接緊密，細(xì)胞難以消化解離，并且培養(yǎng)時(shí)間越久，細(xì)胞間連接越緊密越難消化。所以，消化時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：
 

最后，我們要討論的是細(xì)胞貼壁和增殖緩慢問(wèn)題。尤其剛復(fù)蘇時(shí)細(xì)胞貼壁特別慢，一般2到3天貼壁展開(kāi)（還可能會(huì)有空泡）；有少量發(fā)亮的細(xì)胞漂浮或黏附在細(xì)胞克隆上是正常的，隨后會(huì)進(jìn)入克隆并正常生長(zhǎng)；為避免在細(xì)胞附著初期干擾細(xì)胞，建議到第三天再換液。

同時(shí)該細(xì)胞增殖緩慢，倍增時(shí)間約為72小時(shí)，按1:3傳代的情況下，約一周傳代一次。由于該細(xì)胞對(duì)營(yíng)養(yǎng)需求高，建議使用20%的優(yōu)級(jí)胎牛血清。如果細(xì)胞隨著培養(yǎng)過(guò)程，漂浮得越來(lái)越嚴(yán)重，甚至大塊兒飄起，就要檢查培養(yǎng)基成分和培養(yǎng)環(huán)境是否出現(xiàn)異常。

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