螺旋平板法
螺旋平板法(Spiral plate method)是一種新式微生物快速定量方法,由J.E. Gilchrist、C.B. Donnelly等人最先于1973年提出,主要用于菌落總數測定。
螺旋接種菌落計數是依據阿基米德螺旋原理,使樣品以對數規律螺旋線形式接種在平板上。
樣品接種后,菌落即分布在螺旋軌跡上,隨半徑的增加分布得越來越稀。
采用特殊的計數柵格,自平板外周向中央對平皿上的菌落進行計數,即可得到樣品中微生物的數量。
實驗步驟
取制備好的適宜稀釋度的樣品稀釋液;
選擇模式進行接種;
將平板按標準方法中規定的培養時間和溫度進行培養;
計數每個平板菌落數,并記錄下來。
螺旋平板法使我們能在培養皿表面接種呈對數遞減的曲線。體積是被校準過的,培養皿上每個點的容量都是可知的。計數培養皿指定區域內的菌落數,除以該區域的接種體積,以此可計算出細菌濃度。
經過多年的應用,螺旋平板法已被國外微生物學界普遍認可,被列為美國分析化學家協會(AOAC)的官方方法,也被美國食品藥品監督管理局(FDA)和國際標準化組織(ISO)列為檢測致病菌的標準方法。
我國也在《GB 4789.28-2013食品微生物學檢驗—培養基和試劑的質量要求》和《SN/T 2098-2008食品和化妝品中的菌落計數檢測方法—螺旋平板法》中對螺旋平板法的實驗要求和具體步驟都作了明確規定。
為什么選擇螺旋平板法?
◆ 無需梯度稀釋和逐個接種平板,在一塊平板上即可產生最大1000倍的濃度梯度
◆ 簡化實驗步驟,節省操作時間
◆ 節省大量實驗材料,節約費用
◆ 樣品接種量精確,提高微生物定量實驗的準確度
◆ 不會在平板邊緣長菌,更易計數
微生物學研究結果的可重復性很大程度上依賴于優良的樣品制備。螺旋平板法作為一種新式微生物快速定量方法可降低試驗成本、提高實驗效率,優勢突出,應用前景廣闊。
杭州大微研發的DW-L2000型全自動微生物平皿螺旋接種儀依據阿基米德螺旋,以遞減比率自動接種樣本,可實現標準化大量單顆菌落,方便后續菌落計數、菌落分析純化等實驗需求,廣泛應用于食品、化妝品、藥學實驗室等任何微生物實驗室。
產品優勢:
√ 接種模式:整合市面所有的接種模式,如指數模式、對數模式、比例模式、微分模式等等,每種模式均以加樣半徑為橫坐標、加樣體積為縱坐標,以阿基米德螺旋線為路徑進行接種。
√ 無菌保證:專利設計的一次性微量加樣頭能做到真正無菌取樣。無需清潔消毒,杜絕消毒劑殘留帶來的任何可能的假陰性結果。
√ 適用性強:特殊設計的加樣頭緩沖結構,培養基厚度適用范圍大,對培養基表面平整度無要求。
√ 用途多樣:可在單一平皿中產生1000-10000倍(采用150mm平皿)的濃度梯度,免除連續稀釋和大量接種過程。除細菌計數外,該儀器也可用于抗菌敏感性測試(AST)和AEMS實驗。使用線性模式可改善AMES實驗誘變濃度閾值的檢測。