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luminex多因子檢測樣本收集方法一覽

瀏覽次數(shù):6571 發(fā)布日期:2015-2-23  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

ProcartaPlex™以更少量的樣本完成對更多生物標(biāo)志物的分析。由卓越的免疫試劑供應(yīng)商開發(fā),用于Luminex®平臺,ProcartaPlex使您可以在25-50μL的樣本(血漿、血清、細(xì)胞培養(yǎng)上清液以及其他體液)。實現(xiàn)在25-50μL的樣本中同時對多達(dá)50種因子進(jìn)行檢測與定量。該技術(shù)在多通道“類ELISA”分析中,為每種靶標(biāo)使用了經(jīng)不同染色處理的捕獲微球。相比于傳統(tǒng)的三明治ELISA而言,ProcartaPlex免疫分析可以在使用樣本量少而時間相同的情況下,分析多達(dá)50倍數(shù)量的因子。ProcartaPlex多通道免疫分析提供了多種試劑盒類型,涵蓋六個物種(人類、小鼠、大鼠、非人靈長類、豬以及犬類),從而滿足您的研究需求。

正確的樣本收集整理方法,是實驗成功至關(guān)重要的步驟. 目前ProcartaPlex可以檢測樣本類型有: 細(xì)胞上清、血清、血漿. 盡管其他生物學(xué)樣本沒有經(jīng)過驗證,但是理論上也可以檢測,這些樣本包括: BAL, 唾液,CSF, 組織勻漿液和尿液。

下面我們針對幾種常見樣本的收集、保存方法:

1、血清
全血室溫(20-25 °C)凝固20-30min;
室溫1,000 x g 10min;
收集上清,或者選擇使用血清分離器;
可選:如果樣本是高血脂樣本,請先在2-8°10,000 x g 離心 10min,分離出下層血清;
多因子檢測血清樣本要求新鮮;如果不能在24h內(nèi)檢測,需要分裝在-20 ℃以下,避免反復(fù)凍融。
2、血漿
根據(jù)要求選擇檸檬酸或EDTA作為抗凝劑。如果選擇肝素作為抗凝劑,建議每毫升血不超過10IU肝素(肝素用量過高,可能會導(dǎo)致部分檢測指標(biāo)值偏高)。
收集抗凝全血后30min內(nèi),在4oC 下10,000 x g離心10min,分離收集血漿;
可選:可選:如果樣本是高血脂樣本,請先在2-8°10,000 x g 離心 10min,分離出下層血漿;
多因子檢測血漿樣本要求新鮮;如果不能在24h內(nèi)檢測,需要分裝在-20 ℃以下,避免反復(fù)凍融。
3、細(xì)胞培養(yǎng)上清

檢測分泌性的成份時,最好用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。

4、組織樣本

如果可以,請按照參考文獻(xiàn)推薦的方法。標(biāo)本取完后液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的含有蛋白酶抑制劑的緩沖液, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。

保存過程中如果有沉淀,檢測前樣本應(yīng)該再次離心去除沉淀,建議16,000 x g 離心5min。

以上信息部分來源與eBioscience。




 閱讀原文:http://www.liankebio.com/TechServiceShow/articleID/2015020023.html

發(fā)布者:杭州聯(lián)科生物技術(shù)股份有限公司
聯(lián)系電話:4006721600
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