Y迷宮的行為學檢測方法與注意事項

（1） Y迷宮實驗介紹

      Y迷宮主要應用于動物的辨別性學習，工作記憶及參考記憶的測試。Y迷宮由三個完全相同的臂組成。每個臂盡頭有食物提供裝置，根據(jù)分析動物取食的策略即進入各臂的次數(shù)、時間、正確次數(shù)、錯誤次數(shù)、路線等參數(shù)可以反映出實驗動物的空間記憶能力。相對而言，Y迷宮簡便、可行，相對八臂迷宮來說更加簡單，有一定的實用性，現(xiàn)常用于學習記憶功能評價。Y迷宮、八臂迷宮這類食物獎賞型迷宮任務能夠檢測嚙齒類動物與海馬和前額葉腦區(qū)相關的空間參考記憶和空間工作記憶。當動物在迷宮中尋找食物時，動物需要根據(jù)迷宮周圍的視覺標示，記住它已搜尋過的迷宮臂，以避免重復進入同一個臂，從而有效地獲得食物。這種類型的記憶能指導進行中的行為，被稱為工作記憶。

Y迷宮實驗模型用來研究嚙齒類動物的空間識別記憶能力，這相對于被動回避等實驗的優(yōu)點在于：這種迷宮利用了嚙齒類動物對新異環(huán)境天然探究的自然習性，不需要動物學習任何規(guī)則來趨利避害，能夠有效地反映出動物對新異環(huán)境的識別記憶能力（Dellu et al, 2000; Dellu et al, 1992; Martin et al, 2003）。

（2） Y迷宮裝置

      Y迷宮用醫(yī)用有機板制作，內(nèi)外壁貼黑色膠紙。共 3個臂，各個臂夾角 120 度，每一臂尺寸 30 cm×8 cm×15 cm（長×寬×高），在中央處各有一個可移動的隔板，在迷宮各個臂內(nèi)貼上不同幾何圖形，作為視覺標記。每個Y迷宮的 3 個臂被隨機設為：新異臂（novel arm）、起始臂（start arm）和其他臂（other arm）。新異臂：在實驗的第 1 個階段即訓練期時用隔板擋住，在第 2 個階段即測試期時打開；起始臂：小鼠進入迷宮時所在的臂。整個實驗過程中起始臂和其他臂都是一直打開，動物可以自由出入。迷宮內(nèi)鋪墊木屑，每次訓練或測試結(jié)束后，混勻各個臂里的鋸末，以防動物殘留氣味干擾。迷宮上方 1.5 m處安置攝像鏡頭，全過程錄像。

（3）Y迷宮食物獎賞測試：9:00-12:00

     Y迷宮實驗包含兩個階段，間隔 1h（1 h ITI）。第一個階段為訓練期，新異臂被隔板擋住，小鼠由起始臂放入，在起始臂和其他臂中自由活動 10 min，訓練結(jié)束后，小鼠被放回飼養(yǎng)籠。1 h 后進行第2 個階段實驗。第 2 個階段為檢測期，抽開新異臂隔板，小鼠由起始臂放入，在 3 個臂中自由活動 5 min。錄像記錄 5 min 內(nèi)每只小鼠在各個臂停留的時間和穿梭次數(shù)。數(shù)據(jù)統(tǒng)計：Y迷宮實驗中，5 min 內(nèi)小鼠在各個臂之間停留的時間；Y迷宮實驗中，5 min 內(nèi)小鼠在各個臂的穿梭次數(shù)。

注：實驗中，隨機安排不同動物對應的 Y迷宮的起始臂、新異臂和其他臂，但對于同一只小鼠，在迷宮實驗的兩個階段，三個臂是固定的。由于小鼠對該迷宮測試的記憶時間最長不超過數(shù)小時，所以該迷宮測試可以在同一只小鼠上反復進行，但兩次實驗需間隔至少1周，并改變?nèi)齻�臂的搭配（Dellu et al, 2000）。評價空間識別記憶能力可以用小鼠在各個臂停留的時間作為檢測指標，同時以動物在各個臂的穿梭次數(shù)作為檢測其活動能力的一個指標（Dellu et al, 1992，2000）。Y迷宮的行為學檢測方法

（4） Y迷宮電刺激測試

   Y-迷宮為一個三等臂式反射箱，三臂的夾角為120°，底部為可通電的銅棒，每臂端有一信號燈，燈亮表示安全區(qū)，此臂不通電無電流，另兩臂通電(電壓50 ~ 70 V，大致固定在能使小鼠產(chǎn)生逃避行為的強度)。實驗時，隨即變換安全區(qū)，電擊小鼠，以小鼠立即逃往安全區(qū)為一次正確反應。具體方法：每只小鼠先在迷宮中適應 3 min，每次電擊延遲為5 s，直到小鼠的訓練過程中連續(xù)9 次正確反應即為學會。記錄小鼠學會所需的訓練次數(shù)，訓練次數(shù)越少，說明學習能力越強。2 4 h 后進行記憶保持能力的檢測，以正確反應次數(shù)占總檢測次數(shù)的百分比表示記憶保持能力(正確反應的次數(shù)/總檢測次數(shù)×100%)，此值越高說明記憶力越好。