氫氘交換質(zhì)譜HDX MS服務(wù)
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氫氘交換質(zhì)譜(hydrogen deuterium exchange mass spectrometry, HDX MS)是一項研究蛋白質(zhì)空間構(gòu)象的質(zhì)譜技術(shù)。這項技術(shù)的主要原理是將蛋白質(zhì)置于重水溶液中,蛋白質(zhì)表面的氫原子與重水里的氘原子發(fā)生互換,發(fā)生互換后的蛋白質(zhì)經(jīng)過酶切產(chǎn)生多肽片段,質(zhì)譜鑒定肽段的質(zhì)量:位于蛋白表面的多肽相比位于蛋白內(nèi)部的多肽更容易發(fā)生氫氚原子交換因而質(zhì)量增加,由此來推測蛋白質(zhì)表位構(gòu)象。此外,氫氘交換質(zhì)譜還可用于研究蛋白結(jié)構(gòu)動態(tài)變化、蛋白間相互作用位點、以及鑒別蛋白表面活性位點等應(yīng)用。
氫氘交換質(zhì)譜能夠快速研究溶液中天然蛋白中位于蛋白表面的氨基酸序列,所以在研究蛋白動態(tài)表位活性位點上有著廣泛的應(yīng)用。由于氫氘交換質(zhì)譜借助氫氘原子交換的原理,氫氘原子回交會對實驗結(jié)果的精準(zhǔn)性造成很大的影響,因此避免氫氘原子回交至關(guān)重要。目前控制氫氘原子回交主要通過縮短液質(zhì)分析時間以及把溫度和pH始終控制在最低回交反應(yīng)系數(shù)的范圍內(nèi)。
百泰派克采用waters先進的nanoACQUITY UPLC HD-Exchange System分析系統(tǒng),采用亞二納米色譜顆粒填料,較普通的大顆粒填料,能夠在不損失色譜分離效果的要求下,極大縮短液相分析時間的要求,具有超高的分離度。另外,百泰派克采用在線式自動化前處理與高分辨質(zhì)譜儀聯(lián)機使用,不但保證了實驗數(shù)據(jù)的可靠性,而且提高了實驗效率,充分保證前處理效果及鑒定結(jié)果可靠性。您只需要將您的實驗?zāi)康母嬖V我們并將您的樣品寄給我們,我們會負(fù)責(zé)項目后續(xù)所有事宜,包括樣品處理、酶切、質(zhì)譜檢測、原始數(shù)據(jù)分析等。
氫氘交換質(zhì)譜HDX MS分析流程氫氘交換質(zhì)譜HDX MS-北京百泰派克生物科技有限公司
氫氘交換質(zhì)譜技術(shù)特點• 對樣品需求量小、純度要求相對較低
• 直接研究溶液中蛋白天然空間構(gòu)象,無需獲取蛋白晶體
• 研究動態(tài)變化中的蛋白活性位點和空間表位
• UPLC-HDX-MS系統(tǒng)溫度精準(zhǔn)控制在0±1℃,將氫氘原子回交反應(yīng)控制在最低限度
• 自動化前處理與進樣分析,精準(zhǔn)控制氫氘原子交換反應(yīng)時間
• 利用nanoACQUITY UPLC系統(tǒng)獲得具有高重現(xiàn)性譜圖
• 結(jié)合MassLynx®、DynamX HDX數(shù)據(jù)分析、IDENTITYE和ProteinLynx Global SERVER™,可進行廣泛、及時、交互式的結(jié)果管理
• 蛋白質(zhì)空間構(gòu)象及活性位點研究
• 蛋白質(zhì)空間表位動態(tài)變化
• 蛋白質(zhì)與藥物之間的結(jié)合動態(tài)研究
• 蛋白質(zhì)間相互作用位點研究
• 蛋白質(zhì)突變或其他處理對蛋白質(zhì)構(gòu)象和動力學(xué)的影響
• 蛋白-配體和蛋白樣品
• 樣品濃度>1ug/ul
• 樣品量>10ug
• 注意:樣品最好沒有去垢劑。
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