產品定義
雙向凝膠電泳是將不同種類的蛋白質按照等電點和分子量差異進行高分辨率分離的分析方法。成功的二維電泳可以將2000到3000種蛋白質進行分離，是唯一能同時將上千種蛋白質同時分離和展示的方法，在蛋白質組學中發揮重要的作用。
技術原理
先將蛋白質根據其等電點在pH梯度膠內進行等電聚焦，然后按照它們的相對分子量大小進行SDS聚丙烯酰胺凝膠（SDS-PAGE）第二次電泳分離。電泳后對凝膠進行染色，并用相關軟件對圖像進行分析處理。
實驗流程
注釋：“樣品及實驗預判”包括蛋白質定量、至少一次雙向凝膠電泳實驗，對樣品質量判斷及實驗條件優化。
使用儀器
第一向IEF：Ettan IPGphor Isoelectric Focusing System（GE Amersham）；
第二向SDS-PAGE：Hofer SE 600（GE Amersham）；
掃描儀：UMax Powerlook 2110XL （GE Amersham）。
技術優勢
經典蛋白質組學方法，蛋白質差異變化直觀可見；
經濟實惠。
應用領域
疾病標志物篩選 作用機制研究 植物抗逆研究
藥物作用靶點研究 特殊功能蛋白質篩選
樣品要求
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樣品類型 |
樣品要求（/組樣品） |
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蛋白質提取物 |
濃度>4μg/μl，蛋白質總量>5mg |
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細胞樣品 |
細胞量>108 |
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組織樣品 |
濕重>300mg |
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體液樣品 |
血液體積>1ml |
技術參考案例
[1] Haneda T, Sugimoto M, et al. Comparative proteomic analysis of Salmonella enteric serovar Typhimurium ppGpp-deficient mutant to identify a novel virulence protein required for intracellular survival in macrophages.BMC Microbiol. 2010; 10: 324.
[2] Wang X, Bian Y, et al. A comprehensive differential proteomic study of nitrate deprivation in Arabidopsis reveals complex regulatory networks of plant nitrogen responses. J Proteome Res. 2012; 11(4): 2301-15.
[3] Gromova I, Gromov P, et al. Proteomic profiling of triple-negative breast carcinomas in combination with a three-tier orthogonal technology approach identifies Mage-A4 as potential therapeutic target in estrogen receptor negative breast cancer. Mol Cell Proteomics. 2013; 12(2): 381-94.
