客戶可以根據要求選擇需要服務的步驟，或者一站式制備服務更加優惠。
|
步驟
|
內容
|
時間
|
標準
|
收費
|
|
抗原
制備 |
提供多肽序列，或Genbank號，公司負責合成多肽，偶聯KLH及偶聯檢測載體BSA(OVA)
|
2周
|
多肽合成，10mg純度>95%
|
￥128/A
|
|
偶聯KLH 2mg
|
￥1280
|
|||
|
偶聯BSA(或者OVA) 2mg
|
￥780
|
|||
|
客戶只提供Genbank號
|
4周
|
構建含有客戶認可抗原序列的原核表達載體，進行蛋白表達純化，制備可供免疫的抗原
|
￥4000
|
|
|
客戶提供能正常表達的菌株
|
2周
|
進行表達、純化制備免疫抗原
|
￥2000
|
|
|
客戶選擇真核表達
|
4周
|
構建含有Flag標簽的真核表達載體，293細胞表達目的抗原，用偶聯Flag單抗的beads親和純化目的融合蛋白作為抗原
|
詢價
|
|
|
提取天然蛋白
|
2周
|
提取天然蛋白最為抗原
|
詢價
|
|
|
免疫
|
三次免疫后（效價達不到融合要求繼續免疫）測尾血效價
|
5周
|
免疫5只Bablc小鼠，免疫量50ug/只,最終達到融合效價>1:10000
|
￥1000
|
|
加強
免疫 |
融合前3-5天加強免疫
|
1天
|
蛋白透析，無佐劑50ug/只
|
￥50
|
|
融合
|
PEG1450 （sigmaP7306）
HAT（Invitrogen 21060017 ）血清(Hyclone SH30084.03 ) |
1天
|
取脾臟分離成單細胞與對數期的SP2/0按5：1混合，進行細胞融合，20%胎牛血清，HAT選擇培養基，鋪10塊96孔板
|
￥5000
|
|
上清
檢測 |
融合7天后，ELISA檢測，用檢測抗原包被ELISA板，二抗anti-mouse HRP，TMB顯色
|
1天
|
陰性（正常培養基）OD<0.1陽性OD>0.5視為陽性孔
|
￥2000
|
|
亞克隆
|
對陽性孔采用有限稀釋法進行亞克隆直到含有細胞的所有孔均為陽性
|
4周
|
ELISA檢測挑選OD值高的細胞孔，進行后續亞克隆直到含有細胞的所有孔均為陽性
|
￥8000
|
|
定株
|
陽性穩定的孔進行擴大培養
|
1周
|
擴大培養上清，按客戶要求進行功能檢測（WB/ELISA/IHC），滿足客戶要求后，將應客戶要求交付細胞（每株細胞2管）
|
￥5000
|
|
腹水
|
指定細胞株生產10mL腹水
|
1周
|
離心后10mL腹水
|
￥2000
|
|
亞型
|
應客戶要求測定細胞株亞型
|
1周
|
采用（Sigma ISO2）測定亞型
|
￥2000
|
|
純化
|
ProteinA 或G純化10mL腹水
|
1周
|
根據亞型選擇ProteinA 或G
|
￥2000
|
|
配對
|
純化后的抗體進行競爭實驗
|
3周
|
確定不同克隆之間是否配對
|
詢價
|
|
標記
|
FITC/HRP/BIOTIN/AP等
|
1周
|
應客戶要求對抗體進行標記
|
詢價
|
手機版：單克隆抗體定制服務
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網 電話：021-64166852;13621656896 E-mail：info@bio-equip.com