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microRNA技術服務(化學合成,載體構建,慢病毒包裝,,PCR檢測及引物,靶基因報告載
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具體請參照:http://www.biomart.cn/infosupply/ff808081217164040121941a02cb5793.htm
microRNA 過表達載體
A. 優點:
MiRNA 熒光素酶報告載體具有以下優點:
· 功能性檢測:是一種功能性的分析方法,用于監測細胞內miRNA介導的靶基因的調控
· 可定量分析: miRNAs介導的調控可以通過熒光素酶基因的表達進行定量監測
· 可構建穩定細胞系–載體可用于構建表達報告基因的穩定細胞系.
B. 原理:
pLuc-3UTR報告載體是一系列基于熒光素酶報告的構建體,用于監測miRNA介導的細胞內靶基因調控。每個載體含有CMV啟動子、熒光素酶基因、3 ' UTR 靶基因和SV40終止子序列。MiRNA的表達并與3 ' UTR結合,導致熒光素酶基因表達的抑制。因此miRNA介導的特異靶的調控可通過熒光素酶活*進行監測。比較二個樣本熒光素酶活性可解析調控,明確差異。
詳細請參考 http://www.biomart.cn/infosupply/ff8080811b3b755e011b441ea5e20266.htm
microRNA 慢病毒包裝系統具體講參照:《ViraPowerTM Packaging Mix pLenti expression plasmid DNA》 (Invitrogen)
詳細參照:http://www.biomart.cn/infosupply/ff8080811bb9b4a8011bc03d3396224d.htm
4. microRNA 實時熒光定量PCR檢測
實時熒光定量PCR(Real Time PCR,qRT-PCR)避免了傳統PCR 以終產物檢測定量產生的偏差,提高實驗的重復性。與常規PCR 相比,實時熒光定量PCR 具有特異性更強、有效解決PCR 污染問題、自動化程度高等特點,已成為國際公認的核酸分子定量的標準方法。該技術已被廣泛用于檢測細胞mRNA 表達量的變化;比較不同
組織的mRNA 表達差異;驗證基因芯片,siRNA 干擾的實驗結果。它涉及到DNA或RNA 樣品制備,反轉錄及PCR 反應等一系列重要的分子生物學過程。
配套產品:qPCR實時熒光定量一步法試劑盒
BK2100 http://www.biomart.cn/infosupply/ff80808125d818cb0125d844868d01a3.htm 設計目的片段和內參基因的qPCR 引物:利用Primer5.0 等軟件設計PCR 引物
及探針。我們公司免費為客戶設計引物和探針。
詳細參照:
http://www.biomart.cn/infosupply/ff8080811b3b755e011b44285bd50287.htm5. microRNA 特異引物(部分產品有現貨,具體見microRNA 產品說明)
microRNA(miRNA)是一類有大約22 個核苷酸組成的非編碼小分子RNA,其廣泛存在于真核
生物中。miRNA 在個體發育的不同時期及不同組織中有不同的表達模式,都表明了其在發育
和分化中起有重大的調控作用。迄今為此,對miRNA 的檢測方法主要有Northern Blot 等基
于分子雜交的方法,這些方法敏感度低、耗時長、RNA 的用量較大。miRNA Q-PCR Detection
Kit 采用了國際上公認的核酸檢測標準技術――Real-Time PCR 技術來對miRNA 進行檢測,
其具有快速、特異性強、靈敏度高等優點。
EzOmicsTM miRNA qPCR Detection Primer Set包含了miRNA特異的逆轉錄引物,以及qPCR正、
反向引物套裝。其中莖凸環結構狀的miRNA特異逆轉錄引物可特異性的轉錄成熟的miRNA。再利
用高度特異的正反向引物,使miRNA定量即靈敏又高度特異。EzOmicsTM miRNA qPCR Detection Primer Set 提供了一種最低能檢測到5 個拷貝目標miRNA 的高靈敏度的檢測方法,并且具有一個7 個數量級
的動態變化范圍,反應的模板可以是總RNA 或者已純化的小RNA 等。
配套產品:miRNA 引物檢測試劑盒 BK1010 4OO元
http://www.biomart.cn/infosupply/ff80808121587a8b01215b94717e0321