細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

小鼠生長(zhǎng)因子(mouse GH)ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
大鼠雌二醇(rat E2)ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
土壤無(wú)機(jī)磷（S-PHOS）含量測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/24樣
白介素 -21(IL-21)ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
干擾素 - a (IFN- a )ELISA 規(guī)格：96T法國(guó) Diaclone
大鼠腎損傷分子(rat Kim-1)ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
谷氨酰胺酶（GLS)測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/48樣
白介素 -12 p70(IL-12 p70)ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠血小板源生長(zhǎng)因子-BB(mouse PDGF-BB)ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
大鼠可溶性CD4分子(rat sCD4)ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
褪黑素 CAS 73-31-4 規(guī)格： 20mg 訂購(gòu)|咨詢
十六酸 CAS 21096 規(guī)格： HPLC≥98%；20mg/vial 訂購(gòu)|咨詢
鉤藤堿; Rhynchophylline CAS 76-66-4 規(guī)格： 20mg 訂購(gòu)|咨詢
甲基當(dāng)藥寧 CAS 22172-17-4 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢
相思;L-Abrine CAS 21339-55-9 規(guī)格： 20mg 訂購(gòu)|咨詢
雜交瘤（B類）；Z51B3C10H12A12G2F7B5培養(yǎng)啡因 CAS 21399 規(guī)格： 20mg 訂購(gòu)|咨詢
α-菠甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷 CAS  規(guī)格： 5mg 訂購(gòu)|咨詢
7－羥基馬兜鈴酸A CAS 79185-75-4 規(guī)格： 10mg 訂購(gòu)|咨詢
秋水仙苷 CAS 602-41-5 規(guī)格： 20mg 訂購(gòu)|咨詢
泛酸鈉 CAS  規(guī)格： 100mg 訂購(gòu)|咨詢
粘委陵菜 CAS  規(guī)格： 1g 訂購(gòu)|咨詢
異黃芪皂苷II CAS 86764-11-6 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢

第一種：

是凍存產(chǎn)品，由液氮直接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。

第二種：

是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過(guò)后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。

質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。

購(gòu)買客戶請(qǐng)先與我司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購(gòu)的細(xì)胞名稱、種屬、貨號(hào)、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說(shuō)明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。