運(yùn)輸和保存:
小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤;M5076圖片視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

細(xì)胞名稱
小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤;M5076圖片
形態(tài)特性 梭形
生長(zhǎng)特性 半懸浮生長(zhǎng),貼壁細(xì)胞呈短梭形。
特征特性 該細(xì)胞來源于C57BL/6小鼠卵巢組織自發(fā)的網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤,經(jīng)細(xì)胞形態(tài)和功能鑒定后為巨噬細(xì)胞來源:該細(xì)胞具有吞噬活性;表達(dá)Fc受體,與綿羊紅細(xì)胞形成玫瑰花環(huán);對(duì)51Cr標(biāo)記的紅細(xì)胞具有抗體依賴的細(xì)胞毒反應(yīng);對(duì)同源小鼠腫瘤細(xì)胞(B16-F1)有巨噬細(xì)胞樣的細(xì)胞毒作用,且不需要LPS的激活;沒有NK細(xì)胞的活性;具有同小鼠腹腔巨噬細(xì)胞相當(dāng)?shù)娜芫浮⒎翘禺愋怎ッ负土姿崦傅幕钚裕怀⒔Y(jié)構(gòu)顯示該細(xì)胞內(nèi)有吞噬小泡,缺乏緊密連接,這些特點(diǎn)都符合巨噬細(xì)胞的形態(tài)特征。核型分析顯示該細(xì)胞為亞二倍體,因羅伯遜易位,>80%的染色體
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15% HS
傳代方法 1:2~1:3傳代,3~4天1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長(zhǎng),-80度過夜,最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

Proteasome 20S alpha 2 蛋白酶體PSMα2抗體 0.2ml
MCSF/M-CSF 巨噬細(xì)胞克隆刺激因子抗體 0.1ml
GRK5 G蛋白偶聯(lián)受體激酶5抗體 0.2ml
MTCP1 成熟T淋巴細(xì)胞增殖蛋白1抗體 0.2ml
Rabbit Anti-chicken IgM 兔抗雞IgM 0.2ml
Phospho-Doublecortin (Ser297) 磷酸化雙皮質(zhì)素抗體 0.1ml
ICAM-3/CD50 細(xì)胞間粘附分子-3抗體 0.1ml
KLH 血藍(lán)蛋白抗體 0.1ml
MAL MAL蛋白抗體 0.1ml
TBX1/Brachyury 先心病相關(guān)蛋白TBX1抗體 0.2ml
CNTN4/AXCAM 軸突相關(guān)粘附分子抗體 0.2ml
地榆皂苷II CAS 35286-59-0 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支 訂購(gòu)|咨詢
碘醇 CAS 規(guī)格: 100mg 訂購(gòu)|咨詢
銀杏內(nèi)酯K CAS 規(guī)格: 20mg/支 訂購(gòu)|咨詢
細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷 CAS 20183-47-5 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤;M5076圖片胡椒堿;胡椒酰胺 CAS 94-62-2 規(guī)格: HPLC≥99%,20mg/支 訂購(gòu)|咨詢
新藤黃酸;neogambogic aci CAS 93772-31-7 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
刺芒柄花苷 CAS 486-62-4 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
辛夷脂素 CAS 102036-29-3 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支 訂購(gòu)|咨詢
2,6-二甲基-4-(2-基)-3 CAS 規(guī)格: 50mg 訂購(gòu)|咨詢
普拉洛芬;Praprofen CAS 52549-17-4 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
五味子酯乙 CAS 58546-55-7 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial 訂購(gòu)|咨詢
雪膽素甲 CAS 60137-06-6 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤;M5076圖片細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤;M5076圖片客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);