
細胞名稱
人神經母細胞瘤;SH-SY5Y說明書
形態特性 上皮樣細胞
生長特性 貼壁懸浮混合生長
特征特性 該細胞系來源于1970年建立的一神經母細胞瘤患者的轉移骨瘤灶細胞SK-N-SH經三次克隆后的亞系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。 該細胞顯示中等水平的多巴胺-β-羥基酶活性。 SH-SY5Y細胞的生長密度可高達1X106細胞/cm2,生長成懸浮和貼壁混合生長,有的聚集成細胞叢
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代;3-4天一次
傳代情況 PN8
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11;D13S317:11;D16S539:8,13;D18S51:13,16;D19S433:13,14;D21S11:31,31.2;D2S1338:17,19;D3S1358:15,16;D5S818:7,12;D7S820:7,10;D8S1179:10,15;FGA:23.2,24;TH01:7,10;THOX:8,11;vWA:14,18;
同工酶 無
染色體 46-48
運輸和保存:
人神經母細胞瘤;SH-SY5Y說明書視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿完全培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
可以重發的情況有哪些?
(1)人神經母細胞瘤;SH-SY5Y說明書細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、破損、漏液等,重發;
(2)凍存的細胞復蘇后,絕大多數細胞未存活,重發;
(3)存活的細胞靜置24小時后,絕大多數細胞未存活,重發;
(4)凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,出現污染,重發;
(5)視具體情況而定。
出現問題,不予以重發的情況有哪些?
(1)人神經母細胞瘤;SH-SY5Y說明書客戶造成細胞污染,不重發;
(2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發;
(3)細胞狀態不好,未細胞培養前3天照片的,不重發;
(4)細胞培養時經其它處理的,不重發;
(5)細胞收到2天內,未告知,不重發;
細胞特性:
5)細胞生長方式:上皮樣,不規則細胞,貼壁培養。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態,細胞最好在對數生長期,細胞密度適合,剛剛發生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節約處就節約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍”,傳統的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

AMPD3 紅細胞腺苷脫氨酶3抗體 0.2ml
Thymidylate synthase/TS 胸苷酸合成酶抗體 0.1ml
IL-28B/IL-28C 白細胞介素28B抗體 0.2ml
LGI1/ETL1 富含亮氨酸膠質瘤失活蛋白1抗體 0.1ml
Cystatin E/M 半胱氨酸蛋白酶抑制劑6抗體 0.1ml
phospho-Tau protein(Ser356) 磷酸化微管相關蛋白抗體 0.1ml
CDK11 周期素依賴性激酶11抗體 0.2ml
Musashi 1/Msi1 神經干細胞RNA結合蛋白Musashi1抗體 0.2ml
Histone H3 (tri methyl K36) 三甲基化組蛋白H3抗體 0.1ml
IL-17 白介素-17抗體 0.1ml
PSF2 PSF2蛋白抗體 0.2ml
D-松醇 CAS 10284-63-6 規格: ≥95;20mg 訂購|咨詢
重樓皂苷II CAS 76296-72-5 規格: 20mg 訂購|咨詢
磺胺;純品型;標準品;有證書 CAS 68-35-9 規格: 0.1g 訂購|咨詢
次黃嘌呤 CAS 68-94-0 規格: 20mg 訂購|咨詢
人神經母細胞瘤;SH-SY5Y說明書夏佛塔苷 CAS 51938-32-0 規格: 20mg 訂購|咨詢
毛兩面針素 CAS 483-90-9 規格: 20mg 訂購|咨詢
銹胺;純品型;標準品;有證書 CAS 55814-41-0 規格: 0.1g 訂購|咨詢
一縮二丙二醇 CAS 規格: 1ml 訂購|咨詢
毛蕊異黃苷;Calycosin-7-O CAS 20633-67-4 規格: 20mg 訂購|咨詢
叔丁基對;純品型;標準品-TBHQ CAS 1948-33-0 規格: 0.25g 訂購|咨詢
10-(P) 10-去乙酰基紫杉醇 CAS 規格: 5mg 訂購|咨詢
氫東莨菪堿; 東莨菪堿氫鹽 CAS 114-49-8 規格: HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢