運(yùn)輸和保存:
人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;CEM/C1圖片視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

細(xì)胞名稱
人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;CEM/C1圖片
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 CEM/C1是人T細(xì)胞白血病細(xì)胞株CCRF-CEM(見(jiàn)ATCC CCL-119)具有喜樹(shù)堿抗性的衍生株。 1991年細(xì)胞株選擇并亞克隆了對(duì)CPT的抗性。 細(xì)胞表現(xiàn)出對(duì)CPT類似物水溶性的托泊替康和非水溶性的9-氨基-CPT及10,11-亞甲二氧基-CPT具有交叉抗性。 CEM/C1細(xì)胞對(duì)CPT的敏感性較母系CEM細(xì)胞低31倍。 CEM/C1細(xì)胞表現(xiàn)非典型的多藥抗性和轉(zhuǎn)換拓補(bǔ)異構(gòu)酶I催化活性。 對(duì)CPT的抗性維持6個(gè)月以上。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過(guò)低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過(guò)度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很?chē)?yán)格,我從10%-90%都用過(guò),問(wèn)題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長(zhǎng),-80度過(guò)夜,最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

phospho-IGF1R(Tyr1165+Tyr1166) 磷酸化胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體抗體 0.1ml
Cytochrome c oxidase subunit 2 細(xì)胞色素c氧化酶亞型2抗體 0.1ml
BAFFR/CD268 B細(xì)胞活化因子受體抗體 0.2ml
phospho-STAT1 (Tyr701) 磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體 0.1ml
Goat Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
KLHL21 Kelch樣蛋白21抗體 0.2ml
Bif Bax相互作用因子1抗體 0.2ml
AIF1/IBa-1 離子鈣接頭蛋白抗體 0.1ml
Calreticulin 鈣網(wǎng)蛋白抗體 0.2ml
CKLFSF2/CMTM2 趨化素樣因子超家族成員2抗體 0.2ml
phospho-Tau protein(Ser422) 磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
草定;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) CAS 97886-45-8 規(guī)格: 0.1g 訂購(gòu)|咨詢
苦馬 CAS 72741-87-8 規(guī)格: 1mg 訂購(gòu)|咨詢
香草醇 CAS 4 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
川續(xù)斷皂苷乙 CAS 33289-85-9 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支 訂購(gòu)|咨詢
蘿卜素;Sulforaphane CAS 4478-93-7 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;CEM/C1圖片黃豆甙元 CAS 規(guī)格: 100mg 訂購(gòu)|咨詢
磺胺甲惡唑;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) CAS 723-46-6 規(guī)格: 0.25g 訂購(gòu)|咨詢
格列風(fēng)內(nèi)酯 CAS 61371-55-9 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial 訂購(gòu)|咨詢
亥茅酚苷 CAS 80681-44-3 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支 訂購(gòu)|咨詢
6,7-二甲氧基香 CAS 120-08-1 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
(R型)人參皂苷Rg2 CAS 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
蛋氨酸 CAS 63-68-3 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;CEM/C1圖片細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開(kāi)封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問(wèn)題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;CEM/C1圖片客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);