細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

EphB1+EphB2+EphB3+EphB4  酪氨酸蛋白激酶受體B1+B2+B3+B4抗體 0.2ml
TRIB2  MAPK調控蛋白TRB2抗體 0.2ml
phospho-RGS19(Tyr143)  磷酸化G蛋白信號轉導調節因子19抗體 0.1ml
phospho-c-Jun(Ser243)  磷酸化原癌基因c-Jun抗體 0.1ml
TRPC3  色氨酸相關蛋白3抗體 0.1ml
SMARCA6/HELLS  淋巴特異性解旋酶抗體 0.2ml
Ribonuclease 6  核糖核酸酶6抗體 0.2ml
OPN/BSP  骨橋蛋白抗體(分泌型磷蛋白1)人 0.1ml
Unc18-3  突觸囊泡融合蛋白Unc18-3抗體 0.2ml
Agpat2  溶血磷脂酸酰基轉移酶β抗體 0.2ml
Centaurin γ1  中心體肌動蛋白γ1抗體（增強型PI3K蛋白） 0.2ml
二氫歐山芹醇當歸酸酯;Columbian CAS 5058-13-9 規格： 20mg 訂購|咨詢
11-O-異丁酰基-12-O-乙酰基通關 CAS 1260252-18-3 規格： HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
尚含雞納甙 CAS 53516-73-7 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
土荊皮乙酸 CAS 82508-31-4 規格： HPLC≥98%，20mg/vial 訂購|咨詢
人急性淋巴母細胞性白血病細胞；MOLT-4培養土貝母苷乙 CAS 115810-12-3 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷 CAS 29741-09-1 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
川續斷皂苷Ⅵ;Akebia saponi CAS 39524-08-8 規格： 20mg 訂購|咨詢
哈巴俄苷 CAS 19210-12-9 規格： 20mg 訂購|咨詢
派利文堿 CAS 2673-40-7 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
L-組氨酸 CAS 71-00-1 規格： HPLC≥98%;200mg 訂購|咨詢
青 CAS  規格： 100mg 訂購|咨詢
熟地黃對照藥材 CAS  規格： 1g 訂購|咨詢

第一種：

是凍存產品，由液氮直接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態影響較大，一旦細胞狀態不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。

第二種：

是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。

質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。

購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的細胞名稱、種屬、貨號、數量、協商細胞價格并預約發貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。