
細(xì)胞名稱(chēng)
人卵巢癌細(xì)胞;COC1說(shuō)明書(shū)
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 COC1細(xì)胞建系于1993年(熊世鋼等)。細(xì)胞于原代培養(yǎng)至第17天首次傳代,以后反復(fù)傳代,生物學(xué)特性穩(wěn)定。可表達(dá)多種腫瘤標(biāo)志物和野生型P53蛋白、突變型P53蛋白。裸鼠接種產(chǎn)生分化差的腺癌。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C120
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
運(yùn)輸和保存:
人卵巢癌細(xì)胞;COC1說(shuō)明書(shū)視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人卵巢癌細(xì)胞;COC1說(shuō)明書(shū)細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開(kāi)封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問(wèn)題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人卵巢癌細(xì)胞;COC1說(shuō)明書(shū)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過(guò)低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過(guò)度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很?chē)?yán)格,我從10%-90%都用過(guò),問(wèn)題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長(zhǎng),-80度過(guò)夜,最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

E.coli O157:H7 腸出血性大腸桿菌埃希氏菌O157:H7抗體 0.2ml
Phospho-cdc25A (Ser177) 磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25抗體 0.1ml
laminin 層粘連蛋白抗體 0.1ml
Cytomegalovirus pp65 巨細(xì)胞病毒PP65/CMV低基質(zhì)磷脂蛋白抗體 0.1ml
Ube2H/UBCH2 泛素激活酶2H抗體 0.2ml
CCDC16/zinc finger protein 830 鋅指蛋白830抗體 0.2ml
NOX5 還原型輔酶Ⅱ氧化酶5/酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸抗體 0.2ml
CSFV/Classical swine fever virus 豬瘟病毒抗體 0.2ml
Phospho-EGFR (Ser1045) 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 0.1ml
phospho-Ep300 (Ser1834) 磷酸化轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體 0.1ml
PCDHGB1 原鈣粘蛋白γB1抗體 0.2ml
蟾精(95%) CAS 17008-69-4 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
遼東楤木皂苷Ⅴ;Araloside V CAS 340963-86-2 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
土鱉(地鱉) CAS 規(guī)格: 1g 訂購(gòu)|咨詢(xún)
大葉茜草素 CAS 635-65-4 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支 訂購(gòu)|咨詢(xún)
人卵巢癌細(xì)胞;COC1說(shuō)明書(shū)白果新酸(銀杏酸) CAS 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
芒柄花苷 CAS 486-62-4 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
亥茅酚苷 CAS 80681-44-3 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
紫菀 CAS 10376-48-4 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
葛根素-6″-O-木糖苷 CAS 114240-18-5 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
五味子酯乙 CAS 58546-55-7 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
紫花前胡苷; 紫花前胡甙; 鬧可寧 CAS 495-31-8 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支 訂購(gòu)|咨詢(xún)
羥基紅花黃色素A CAS 78281-02-4 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)