細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

CRMP4/DRP3  腦衰蛋白反應調節蛋白4抗體 0.2ml
UBTD1  泛素結構域蛋白1抗體 0.2ml
GLO1  乙二醛酶1抗體 0.1ml
P73 protein  P73腫瘤抑制基因抗體 0.1ml
phospho-Dnmt1(Tyr969)  磷酸化DNA甲基轉移酶1抗體 0.1ml
Phospho-SATB1 (Ser47)  磷酸化核基質結合區結合蛋白1抗體 0.1ml
Twist2  TWIST蛋白2抗體抗體 0.2ml
STIL  中斷位點蛋白STIL抗體 0.2ml
HDHD3  HDHD3蛋白抗體 0.2ml
phospho-CDKN1A/P21 (Ser146)  磷酸化p21蛋白抗體 0.1ml
GABRA3/GABA A Receptor alpha 3  G氨基受體α3抗體 0.2ml
羊藿次苷I（95%） CAS  規格： 20mg 訂購|咨詢
紫蘇烯 CAS 539-52-6 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
鳶尾苷元磺酸鈉;tectorigenin CAS 548-77-6 規格： 20mg 訂購|咨詢
（R型）人參皂苷Rg3GINSESI CAS  規格： HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢
紫蘇醇 CAS 536-59-4 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
多根堿 CAS 39089-30-0 規格： HPLC≥98%;20mg/支 訂購|咨詢
人甲狀腺鱗癌細胞；SW579培養7-甲氧基香;7-Methoxyco CAS 531-59-9 規格： 20mg 訂購|咨詢
對氨基水楊酸異煙肼 CAS 2066-89-9 規格： 100mg 訂購|咨詢
青藤堿 CAS 115-53-7 規格： 20mg 訂購|咨詢
7-乙基-10羥基喜樹堿 CAS 119577-28-5/86639-52-3 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
香紫蘇醇 CAS 515-03-7 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
菌唑;純品型;標準品;有證書 CAS 88671-89-0 規格： 0.1g 訂購|咨詢

第一種：

是凍存產品，由液氮直接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態影響較大，一旦細胞狀態不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。

第二種：

是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。

質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。

購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的細胞名稱、種屬、貨號、數量、協商細胞價格并預約發貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。