運(yùn)輸和保存:
人骨肉瘤細(xì)胞;SW 1353圖片視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

細(xì)胞名稱
人骨肉瘤細(xì)胞;SW 1353圖片
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 SW 1353細(xì)胞最初從一位72歲女性白人的右肱骨原發(fā)性II級(jí)骨肉瘤中得到。 最初的培養(yǎng)基是含有可的松和胰島素的L-15添加10%FBS和抗生素。 1982年1月ATCC收到1支傳代至12代的凍存管。
培養(yǎng)條件 L15: Leibovitz Medium 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(25+5)
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

HNF4/TCF4/HNF4A 肝細(xì)胞核因子4α抗體 0.1ml
PCDHGA8 原鈣粘蛋白γA8抗體 0.2ml
C9ORF43 9號(hào)染色體開放閱讀框43抗體 0.2ml
SLC7A9 離子轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白SLC7A9抗體 0.2ml
Mouse Anti-Bov IgG/PE PE標(biāo)記的小鼠抗牛IgG 0.1ml
AP2 gamma 轉(zhuǎn)錄因子AP-2γ抗體 0.1ml
IMPDH1 肌苷單磷酸脫氫酶1抗體 0.2ml
FLAG Tag (NT) FLAG Tag標(biāo)簽抗體(N端) 0.1ml
TRAK1 驅(qū)動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml
CDHF15/FAT3 鈣粘蛋白15抗體 0.2ml
SRC src原癌基因抗體 0.2ml
冬凌草乙素 CAS 52617-37-5 規(guī)格: 10mg 訂購|咨詢
異連翹酯苷A;Isoforsythias CAS 1357910-26-9 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
辣椒素;Capsaicin CAS 2444-46-4 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
香蒲新甙 CAS 104472-68-6 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial 訂購|咨詢
王不留行 CAS 規(guī)格: 1.5g 訂購|咨詢
2,3,4-三甲醇 CAS 規(guī)格: 50mg 訂購|咨詢
去甲烏藥堿 CAS 11041-94-4 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
蛇床子對(duì)照藥材 CAS 規(guī)格: 1g 訂購|咨詢
洛他唑 CAS 73963-72-1 規(guī)格: 50mg 訂購|咨詢
異蓮心堿 CAS 6817-41-0 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
青酶 CAS 9001-74-5 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
3,5,6,7,8,3’,4’-七甲氧基 CAS 規(guī)格: 10mg 訂購|咨詢
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人骨肉瘤細(xì)胞;SW 1353圖片細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人骨肉瘤細(xì)胞;SW 1353圖片客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);