
細(xì)胞名稱
人典型小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H1688說明書
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 這株細(xì)胞來源于一位治療之前的患者的肝轉(zhuǎn)移灶。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(42+5)
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
運輸和保存:
人典型小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H1688說明書視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人典型小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H1688說明書細(xì)胞運輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人典型小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H1688說明書客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

Phospho-Beta-Catenin (Ser552) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體 0.1ml
KCNE2 鉀離子通道蛋白家族成員2抗體 0.2ml
Insulin Receptor alpha 胰島素受體α抗體 0.1ml
Phospho-LRP6(Thr1479) 磷酸化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體 0.1ml
INPPL1 肌醇聚磷酸鹽磷酸酶樣蛋白1抗體 0.2ml
PNPLA1 含patatin樣磷脂酶1抗體 0.2ml
Donkey anti-Goat IgG whole serum 驢抗羊IgG抗血清 1ml
Claudin 1 緊密連接蛋白1抗體 0.1ml
phospho-RAD51(Thr310) 磷酸化Rad51抗體 0.1ml
IL-6 白介素6 0.1ml
GDPD5 甘油磷酸二酯酶磷酸結(jié)構(gòu)域5抗體 0.2ml
;撬 CAS 107-35-7 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
茯苓酸 CAS 29070-92-6 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg/vial 訂購|咨詢
麝香草酚 CAS 89-83-8 規(guī)格: 100mg 訂購|咨詢
蒼術(shù)素 CAS 55290-63-6 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial 訂購|咨詢
人典型小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H1688說明書賴氨匹林 CAS 62952-06-1 規(guī)格: 100mg 訂購|咨詢
富馬酸比索洛爾 CAS 104344-23-2 規(guī)格: 100mg 訂購|咨詢
催吐蘿芙木定 CAS 3911-19-1 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
川楝子 CAS 規(guī)格: 1g 訂購|咨詢
人參皂苷F1;Ginseside F CAS 53963-43-2 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
右旋四氫巴馬汀 ; D-Tetrahyd CAS 3520-14-7 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
酸棗仁皂苷D CAS 194851-84-8 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
補骨脂寧;Corylin CAS 53947-92-5 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢