
細(xì)胞名稱
人肺腺癌細(xì)胞;NCI-H1395說明書
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 這株細(xì)胞是1986年4月建株的;颊呶鼰煛 每年15包。 ATCC CRL-5957是一株來源于同一患者的類淋巴母細(xì)胞。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化5分鐘。1:2。5-6天長滿。
傳代情況 P(23+5)
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X;CSF1PO:12;D13S317:10,14;D16S539:11,13;D18S51:12,14;D19S433:13,16;D21S11:29;D2S1338:17,24;D3S1358:15;D5S818:12;D7S820:8;D8S1179:12,14;FGA:18,23;TH01:6,9.3;TPOX:8;vWA:14,17
同工酶
染色體
運(yùn)輸和保存:
人肺腺癌細(xì)胞;NCI-H1395說明書視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人肺腺癌細(xì)胞;NCI-H1395說明書細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人肺腺癌細(xì)胞;NCI-H1395說明書客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

TBX18 轉(zhuǎn)錄因子Tbx18抗體 0.2ml
SLK/Fyn 酪氨酸蛋白激酶Fyn(同步原癌基因)抗體 0.2ml
INTS3 集成復(fù)雜蛋白亞單位3抗體 0.2ml
PAPSS1 腺苷酸硫酸激酶1抗體 0.2ml
phospho-PI3KCA(Tyr317) 磷酸化磷脂酰肌醇激酶催化亞單位A抗體 0.1ml
Goat anti-Rabbit IgG whole serum 羊抗兔IgG抗血清 1ml
SHC3 SH2結(jié)構(gòu)域蛋白C3抗體 0.2ml
CTAG1B/Cancer/testis antigen 1 腫瘤/抗原1B 0.2ml
Phospho-FoxO1 (Ser319) 磷酸化叉頭蛋白家族1抗體 0.1ml
OTUB1 泛素特異性蛋白酶OTB1抗體 0.2ml
C20ORF141 20號染色體開放閱讀框141抗體 0.2ml
綿萆薢對照藥材 CAS 規(guī)格: 1g 訂購|咨詢
長春質(zhì)堿 CAS 2468-21-5 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢
一枝蒿庚素;Bullatine G;so CAS 509-24-0 規(guī)格: 10mg 訂購|咨詢
三聚胺 CAS 108-78-1 規(guī)格: HPLC≥98%;200mg 訂購|咨詢
人肺腺癌細(xì)胞;NCI-H1395說明書吳茱萸堿 CAS 518-17-2 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
白樺脂酸 CAS 472-15-1 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
絡(luò)塞維 CAS 84954-92-7 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
雌酚;Estrone CAS 53-16-7 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
環(huán)黃芪醇 CAS 84605-18-5 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
蝙蝠葛諾林堿 CAS 2831-75-6 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
惡唑菌;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 CAS 131807-57-3 規(guī)格: 0.1g 訂購|咨詢