運(yùn)輸和保存:
人骨肉瘤細(xì)胞;MNNG/HOS Cl #5 圖片視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

細(xì)胞名稱
人骨肉瘤細(xì)胞;MNNG/HOS Cl #5 圖片
形態(tài)特性
生長特性 貼壁生長
特征特性 這株細(xì)胞是HOS(ATCC CRL-1543TM)經(jīng)0.01mcg/ml MNNG(一種致癌的亞硝胺)轉(zhuǎn)化而來。 這株細(xì)胞飽和濃度高,在軟瓊脂中的克隆形成率高,并能在裸鼠中成瘤。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(40+5)
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

SPARC 富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白抗體 0.2ml
CDK5RAP2 CDK5激活結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml
CCDC153 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白153抗體 0.2ml
ABI2 腫瘤抑制基因ABI2/精氨酸酪氨酸蛋白激酶結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
ERCC6L 發(fā)育相關(guān)蛋白ERCC6L抗體(乙醇致畸因子) 0.2ml
5-HTT 5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 0.1ml
phospho-c-Raf(Ser338/Tyr340) 磷酸化原癌基因c-Raf抗體 0.1ml
Phospho-MYPT1 (Ser668) 磷酸化肌球蛋酸酶抗體 0.1ml
C17orf104 17號(hào)染色體開放閱讀框104抗體 0.2ml
ATAD2 三磷酸腺苷酶家族蛋白2抗體 0.2ml
KiSS1R/GPR54 G蛋白偶聯(lián)受體54抗體 0.1ml
3-正基苯酞 CAS 551-08-6 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial 訂購|咨詢
柚皮素 CAS 480-41-1 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg/vial 訂購|咨詢
對(duì)照品 CAS 規(guī)格: 1.5g 訂購|咨詢
鉀 CAS 規(guī)格: 100mg 訂購|咨詢
酸普拉睪鈉 CAS 1099-87-2 規(guī)格: 50mg 訂購|咨詢
人骨肉瘤細(xì)胞;MNNG/HOS Cl #5 圖片阿魏酸 CAS 171876-65-6 規(guī)格: 100mg 訂購|咨詢
愛普列特 CAS 規(guī)格: 50mg 訂購|咨詢
豆蔻對(duì)照藥材 CAS 規(guī)格: 1g 訂購|咨詢
順式那格列奈 CAS 規(guī)格: 30mg 訂購|咨詢
甲基辛弗林鹽 CAS 7437-54-9 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
托拉塞米 CAS 規(guī)格: 100mg 訂購|咨詢
穿山龍 CAS 規(guī)格: 5g 訂購|咨詢
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人骨肉瘤細(xì)胞;MNNG/HOS Cl #5 圖片細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人骨肉瘤細(xì)胞;MNNG/HOS Cl #5 圖片客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);