細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

MAX protein  Myc基因相關X因子抗體 0.1ml
NCC27/CLIC1  氯離子通道蛋白27抗體 0.1ml
SLC29A4  腦質膜單胺轉運蛋白PMAT抗體 0.1ml
EphA4 R/Eph receptor A4  酪氨酸蛋白激酶A4受體抗體 0.2ml
Mouse Anti-rabbit IgG/Cy5  Cy5標記的小鼠抗兔IgG 0.1ml
PCDHGA10  原鈣粘蛋白γ10抗體 0.2ml
DENND2D  MAP激酶激活死亡域蛋白2D抗體 0.2ml
MO25 alpha/CAB39  鈣結合蛋白39抗體 0.1ml
Iroquois homeobox protein 3  Irx3蛋白抗體 0.2ml
Aggrecan1  軟骨蛋白聚糖抗體 0.1ml
Goat Anti-rat IgG/Gold  膠體金標記的羊抗大鼠IgG 0.5ml
富馬酸盧帕他定 CAS  規格： 100mg 訂購|咨詢
α-亞酸 CAS 463-40-1 規格： 20mg 訂購|咨詢
長春質堿 CAS 2468-21-5 規格： 20mg 訂購|咨詢
地骨皮甲素 CAS 75288-96-9 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
馬來酸咪 CAS  規格： 100mg 訂購|咨詢
酸長春新堿 CAS  規格： HPLC≥98%，20mg/支 訂購|咨詢
人子宮頸表皮癌細胞；MS751培養豆蔻木脂素 CAS 171485-39-5 規格： 20mg 訂購|咨詢
甲磺酸多唑嗪 CAS 77883-43-3 規格： 100mg 訂購|咨詢
異環磷酰胺化合物III CAS  規格： 50mg 訂購|咨詢
常春藤皂苷元;Hederagenin CAS 465-99-6 規格： 20mg 訂購|咨詢
伊曲康唑 CAS 84625-61-6 規格： 50mg 訂購|咨詢
異芒果苷 CAS 24699-16-9 規格： HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢

第一種：

是凍存產品，由液氮直接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態影響較大，一旦細胞狀態不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。

第二種：

是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。

質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。

購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的細胞名稱、種屬、貨號、數量、協商細胞價格并預約發貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。