細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

ADAMTS12  整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-12抗體 0.2ml
ADAMTSL4  整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶樣4蛋白抗體 0.2ml
FSH/FSHB  促卵泡刺激素抗體 0.1ml
CPI17 alpha  蛋酸激酶PKC/CPI-17抗體 0.1ml
ENTHD1/Epsin2B  Epsin2B蛋白抗體 0.2ml
PHYH  植烷酸氧化酶抗體 0.2ml
NUSAP1  核仁和紡錘體相關蛋白1抗體 0.2ml
SCN10A/NAV1.8  鈉通道蛋白10α抗體 0.2ml
Rabbit anti-MG IgG/Bio  生物素標記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1ml
ECG2  食道癌相關基因抗體 0.1ml
CCL28/MEC  粘膜相關上皮趨化因子28抗體 0.1ml
桑色素；桑黃素 CAS 480-16-0；654055-01-3 規格： HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢
多效唑;純品型;標準品;有證書 CAS 76738-62-0 規格： 0.1g 訂購|咨詢
甲磺隆;純品型;標準品;有證書 CAS 74223-64-6 規格： 0.1g 訂購|咨詢
苯甲酰新原堿;苯甲酰中原堿 CAS 63238-67-5 規格： HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢
甲氧醉椒素 ;Yangonin CAS 500-62-0 規格： 10mg 訂購|咨詢
3,7-O-二啡酰奎寧酸; CAS  規格： 20mg 訂購|咨詢
人Burkitt＇s淋巴瘤細胞；NAMALWA培養α-三聯 CAS  規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
文多靈;Vindoline CAS 2182-14-1 規格： 20mg 訂購|咨詢
水楊酸 CAS 69-72-7 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
卡馬平 CAS 298-46-4 規格： 100mg 訂購|咨詢
肟菌酯;純品型;標準品;有證書 CAS 141517-21-7 規格： 0.1g 訂購|咨詢
人參三醇 CAS 32791-84-7 規格： 20mg 訂購|咨詢

第一種：

是凍存產品，由液氮直接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態影響較大，一旦細胞狀態不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。

第二種：

是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。

質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。

購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的細胞名稱、種屬、貨號、數量、協商細胞價格并預約發貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。