運(yùn)輸和保存:
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 205圖片視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶(hù)協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿(mǎn)干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿(mǎn)完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

細(xì)胞名稱(chēng)
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 205圖片
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系1957年由T.U.Sample等從患有結(jié)腸癌的70歲男性白人的腹水分離。 該病人在取腹水樣品前已用5-氟尿嘧啶治療4-6周。 角蛋白免疫過(guò)氧化物酶染色陽(yáng)性。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿(mǎn)。
傳代情況 PN5
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:10,12;D16S539:12,13;D18S51:18;D19S433:13,14;D21S11:30.2,33.2;D2S1338:17,18;D3S1358:16;D5S818:10,13;D7S820:9,10;D8S1179:9,14;FGA:21,23;TH01:8,9;TPOX:11;vWA:15
同工酶
染色體
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過(guò)低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過(guò)度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很?chē)?yán)格,我從10%-90%都用過(guò),問(wèn)題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長(zhǎng),-80度過(guò)夜,最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

HER2 receptor(NT) HER2受體抗體 0.1ml
FBXO42 FBXO42蛋白抗體 0.2ml
CCDC42 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白42抗體 0.2ml
Runx3 Runx3抗體 0.1ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
RYBP/APAP1/CD337 凋亡相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
PPHLN1 脈周蛋白1抗體(胃癌抗原蛋白Ga50) 0.2ml
VWCE VWCE抗體 0.2ml
ANGEL2 ANGEL2蛋白抗體 0.2ml
FBXO21 F-box蛋白21抗體 0.2ml
Phospho-PTPN11(Tyr542) 磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶2抗體 0.1ml
頭孢唑林雜質(zhì)E CAS 規(guī)格: 50mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
斯皮諾素 CAS 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
新補(bǔ)骨脂異黃 CAS 41060-15-5 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
酸 CAS 80286-58-4 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
喜樹(shù)堿 CAS 2114454 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 205圖片九里香 CAS 19668-69-0 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
苦玄參苷ⅠA CAS 528-48-3 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支 訂購(gòu)|咨詢(xún)
孕三烯 CAS 規(guī)格: 50mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
柴胡皂苷A CAS 20736-09-8 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支 訂購(gòu)|咨詢(xún)
特女貞苷 CAS 39011-92-2 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
五味子甲素 CAS 61281-38-7 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
黏質(zhì)雷氏菌 CAS 規(guī)格: 凍干粉 訂購(gòu)|咨詢(xún)
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 205圖片細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開(kāi)封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問(wèn)題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 205圖片客戶(hù)造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶(hù)不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);