細(xì)胞名稱 人膽囊癌細(xì)胞；GBC-SD [GBCSD]說明書
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 GBC-SD 細(xì)胞株是王展明等2000年從一位61歲的男性低分化膽囊癌患者中建立的。 細(xì)胞的形狀有多邊形、紡錘形和正方形。 分泌CEA和CA19-9。倍增時間大約為21.4小時。 可移植到裸鼠。 生成的腫瘤與原發(fā)腫瘤相似。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。5天長滿。
傳代情況 PN
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X,Y；CSF1PO:13；D13S317:8,12；D16S539:11,13；D18S51:14,21；D19S433:14,15.2；D21S11:30,31；D2S1338:17,24；D3S1358:17；D5S818:11；D7S820:11,12；D8S1179:10,12；FGA:23；TH01:7,10；TPOX:11；vWA:16,17
同工酶
染色體

運(yùn)輸和保存：

人膽囊癌細(xì)胞；GBC-SD [GBCSD]說明書視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。

2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

（1）人膽囊癌細(xì)胞；GBC-SD [GBCSD]說明書細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；

（2）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；

（3）存活的細(xì)胞靜置24小時后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；

（4）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時后并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；

（5）視具體情況而定。

（1）人膽囊癌細(xì)胞；GBC-SD [GBCSD]說明書客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；

（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；

（3）細(xì)胞狀態(tài)不好，未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；

（4）細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；

（5）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對數(shù)生長期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍”，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實驗室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實驗室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

Goat Anti-rabbit IgG/PE  PE標(biāo)記的羊抗兔IgG 0.1ml
RNF213  環(huán)指蛋白213 0.2ml
RNF157  環(huán)指蛋白157抗體 0.2ml
M2-PK (pyruvate Kinase M2)  酸激酶-M2 0.1ml
FKBP38  FK506結(jié)合蛋白38抗體 0.2ml
CLLD8/SETDB2  組蛋白H3-K9甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml
FANCG  DNA損傷修復(fù)基因XRCC9抗體 0.1ml
Cyclin A2/CCN1  周期素A2抗體 0.2ml
Caldesmon  鈣介質(zhì)素抗體 0.1ml
Insulin  抗重組人胰島素抗體 0.1ml
phospho-LRP1(Ser4523)  磷酸化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1抗體 0.1ml
重樓皂苷II 英文名稱 Polyphyllin II  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 92%
竹葉香附素A 英文名稱 Raddeanin(Anemodeanin) A  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 98%
梓醇 英文名稱 Catalpol  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： ≥98%
紫草酸 英文名稱  lithospermic acid  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 96%
人膽囊癌細(xì)胞；GBC-SD [GBCSD]說明書紫堇靈 英文名稱 Corynoline  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： ≥98%
紫丁香苷 英文名稱 Syringin  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 95%
紫花前胡素 英文名稱 DECURSIN  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： ≥97%
紫杉葉素 英文名稱 (+)-Taxifolin  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： ≥95%
紫杉醇 英文名稱 Paclitaxel  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： ≥98%
紫菀酮 英文名稱 Shionone  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 97%