運輸和保存:
人膠質(zhì)瘤細胞;SHG-44 [SHG44]圖片視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

細胞名稱
人膠質(zhì)瘤細胞;SHG-44 [SHG44]圖片
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 SHG-44細胞株源自一例2-3級前沿淋巴結(jié)星細胞瘤。 染色體組型顯示89.2%的超三倍體。在Wistar大鼠和裸鼠中接種都能成功。 細胞含有神經(jīng)系統(tǒng)特有的S-100蛋白和星細胞特有的GFA蛋白。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
細胞特性:
5)細胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),細胞最好在對數(shù)生長期,細胞密度適合,剛剛發(fā)生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

RAD50 DNA修復蛋白Rad50抗體 0.2ml
C20orf103 20號染色體開放閱讀框103抗體 0.2ml
Rabbit Anti-dog IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗狗IgG 0.1ml
AHI1 白血病相關(guān)蛋白AHI1抗體 0.2ml
GMCL1L 生殖細胞樣蛋白1樣蛋白抗體 0.2ml
MTNR1A/MTR-1A/MEL-1A-R 褪黑素受體1A/松果體素受體1A抗體 0.1ml
phospho-P53(Thr55) 磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體 0.1ml
Phospho-CHK2 (ser33) 磷酸化細胞周期檢測點激酶2抗體 0.1ml
Mouse Anti-Bov IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記的小鼠抗牛IgG 0.1ml
Rabbit Anti-chicken IgM/RBITC 羅丹明標記的兔抗雞IgM 0.3ml
FBXO7 F-box蛋白家族FBXO7抗體 0.2ml
遠志 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
苦地丁 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
刺五加 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
柴胡 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量
人膠質(zhì)瘤細胞;SHG-44 [SHG44]圖片野菊花 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
夏枯草 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
射干 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
西洋參 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
番瀉葉(狹葉番瀉) 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
黃精(滇黃精) 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量:
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人膠質(zhì)瘤細胞;SHG-44 [SHG44]圖片細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細胞復蘇后,絕大多數(shù)細胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細胞靜置24小時后,絕大多數(shù)細胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人膠質(zhì)瘤細胞;SHG-44 [SHG44]圖片客戶造成細胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細胞狀態(tài)不好,未細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);