
細(xì)胞名稱
人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞;HEL說明書
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 這株淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞株,源自一位30歲白人男性一,患有惡性紅細(xì)胞白血病,能夠自然產(chǎn)生并能誘導(dǎo)球蛋白合成。 細(xì)胞的EB病毒核抗原陰性,沒有表面免疫球蛋白與細(xì)胞質(zhì)免疫球蛋白。 HEL細(xì)胞表達(dá)HLA抗原(HLA-A3, AW32, BW35), β-2 小球蛋白,一定比例的細(xì)胞還表達(dá)Ia抗原。 這個(gè)細(xì)胞株提供了一種用于研究紅細(xì)胞分化和球蛋白基因表達(dá)的模型。 它類似于小鼠中的血友病。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10%
傳代方法 1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,11;D13S317:9,11;D16S539:11;D18S51:12,16;D19S433:11,13;D21S11:29,30.2,31.2;D2S1338:18,19;D3S1358:15;D5S818:11;D7S820:7;D8S1179:13,15;FGA:21,22,23;TH01:7;TPOX:11;vWA:14,17
同工酶
染色體
運(yùn)輸和保存:
人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞;HEL說明書視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞;HEL說明書細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞;HEL說明書客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長(zhǎng),-80度過夜,最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

ASMTL ASMTL蛋白抗體 0.2ml
Enkephalin/P-ENK 腦啡肽抗體 0.1ml
EBNA1/EBV Nuclear Antigen EB病毒核抗原1抗體 0.2ml
SCCA/SERPINB4 絲氨酸蛋白酶抑制劑B4抗體(鱗狀細(xì)胞癌抗原) 0.2ml
Rabbit Anti-MK IgM/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗猴IgM 0.1ml
Cyclooxygenase 2/COX2 前列腺素過氧化物合成酶2抗體 0.1ml
Staphyloccocus aureus Rosenbach tropina 金黃色葡萄球菌菌體蛋白抗體 1ml
NRP1/CD304 神經(jīng)纖毛蛋白1抗體 0.1ml
Phospho-PLC gamma 2 (Tyr759) 磷酸化磷酯酶Cγ2抗體 0.1ml
KLHL24 Kelch樣蛋白24抗體 0.2ml
RUBISCO 核酮糖1,5二磷酸羧化酶抗體 0.1ml
原薯蕷皂甙 英文名稱 Protodioscin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
蛇床子素 英文名稱 Osthole 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞;HEL說明書麝香酮 英文名稱 Muscone 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: GC≥98%
奈酚 英文名稱 Kaempferol 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
蕓香柚皮苷 英文名稱 Narirutin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
水楊苷 英文名稱 Salicin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
水飛薊賓 英文名稱 Silymarin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
鼠李糖 英文名稱 Rhamnose 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
芍藥苷 英文名稱 Paeoniflorin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
甜菜堿 英文名稱 Betaine 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: HPLC≥98%