運(yùn)輸和保存:
人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞;SK-N-MC圖片視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶(hù)協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿(mǎn)干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿(mǎn)完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

細(xì)胞名稱(chēng)
人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞;SK-N-MC圖片
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 這株細(xì)胞與HTB-11都是神經(jīng)源的。1971年9月分離得到SK-N-MC后,發(fā)現(xiàn)它有中性多巴胺-β-羥化酶活性,也有細(xì)胞內(nèi)兒茶酚胺,用甲醛可以誘導(dǎo)出熒光。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿(mǎn)。
傳代情況 PN5
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過(guò)低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過(guò)度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很?chē)?yán)格,我從10%-90%都用過(guò),問(wèn)題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長(zhǎng),-80度過(guò)夜,最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

PCDHB11 原鈣粘蛋白β11抗體 0.2ml
CCL17/ABCD2 胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子抗體 0.1ml
Rabbit Anti-Goat IgG/Bio 生物素標(biāo)記的兔抗羊IgG 0.1ml
phospho-HDAC1(Ser423) 磷酸化組蛋白去乙;1抗體 0.1ml
DCUN1D4 DCUN1D4蛋白抗體 0.2ml
Sidekick 1 細(xì)胞粘附分子伴侶蛋白1抗體 0.2ml
PADI4 關(guān)節(jié)炎相關(guān)基因抗體 0.2ml
NMP-22 核基質(zhì)蛋白22 0.1ml
Cystatin C/CST3 胱抑素C/半胱氨酸蛋白酶抑制劑C抗體 0.2ml
CD160/By55 NK細(xì)胞受體BY55抗體 0.2ml
MYLK3 肌球蛋白輕鏈激酶3抗體 0.2ml
銀杏內(nèi)酯A 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: Ginkgolide A
銀杏內(nèi)酯B 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: Ginkgolide B
銀杏內(nèi)酯C 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: Ginkgolide C
人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞;SK-N-MC圖片白果內(nèi)酯 英文名稱(chēng) 銀杏內(nèi)酯BB 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: (−)-Bilobalide
植酸 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: Phytic acid
蝥素 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: Cantharidin
去甲蝥素 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: Norcantharidin
膽酸 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: Cholic acid
龍膽苦苷 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: Gentiopicroside
豬去氧膽酸 英文名稱(chēng) 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量: Hyodeoxycholic acid
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞;SK-N-MC圖片細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開(kāi)封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問(wèn)題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞;SK-N-MC圖片客戶(hù)造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶(hù)不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);